羊组织中替米考星残留的检测方法研究.pdfVIP

中国动物检疫 2008年第 25卷第 11期 ——34—— 羊组织中替米考星残留的检测方法研究 王雪敏。石玉祥，李 存 (河北工程大学农学院，河北邯郸 056021) 摘 要：建立羊组织中替米考星残留固相萃取高效液相色谱紫外检测方法，检测限为0．01--0．O5~g／g，回收率范围 为78．5％～97．3％。线性范围为0．Ol~251,Lg／ml。相对标准偏差为2．7％~10．3％，为替米考星的残留分析提供 了可靠的分析 方法 。 关键词：羊组织：替米考星；高效液相色谱 ；残留检测 中图分类号：$859．84 文献标识码 ：B 文章编号 ：1005—944X(2008)11-0034—02 替米考星是一种畜禽专用大环 1100紫外检测器 ．T19900色谱工作 气吹至近干 流动相稀释定容至 1 内酯类抗生素．由泰乐菌素半合成制 站 ，美 国Agilent公司：SPE柱 ，Bon． m1．在漩涡混合仪上涡动使混匀。0．2 得。替米考星具有广谱抗菌作用 ．对 dElut，C18，500mg，6ml。 m 滤膜过滤 ，取 100p进高效液相 革兰氏阳性菌、某些阴性菌、支原体 、 1．4 色谱条件 检测器：紫外检测 色谱仪测定 螺旋体等均有抑制作用 ：对胸膜肺炎 器 ：检测波长：280nm；色谱柱 ：Wa— 1．7 定量限和检测限的测定 取空 放线杆菌、巴氏杆菌及畜禽支原体具 ters，symmetry C18，D3．9mm xl50mm ； 白的羊肌肉、肝脏、脂肪 。10个平行， 有比泰乐菌素更强的抗菌活性。已被 流速 ：1．0ml／min。进样量：100 L。 按 上述样 品前处理 的方法处理 ．进 推荐用于治疗和预防牛、羊、禽、猪等 1．5 标准曲线绘制 用流动相将替 样 ．高效液相色谱检测 ，测得基线噪 溶血性巴氏杆菌、多杀性巴氏杆菌肺 米考星的标准贮备液稀释成0．02txg／音值 ．计算检测限(Thelimitsofde— 炎．放线杆菌属胸膜肺炎 ．支原体和 ml、0．2p~g／ml、0．41xg／ml、4~g／ml、lOng／ tection．LOD)和定量限(Thelimitsof 其敏感菌感染引起的肺炎及奶牛乳 ml、40t~gm／l的标准工作溶液 ，各取 quantitation，LOQ)．按信噪 比SN／=3 房炎。它作为一种高效畜用抗生素 ． 100txl进 HPLC分析．每个浓度进样 为LOD，S／N=10为LOQ。 有很好的应用前景[1-2]o本研究参考国 测定 3次 ．求平均值 ．以浓度为横坐 1．8 添加 回收率和精密度 分别取 外相关方法进行优化口_习．成功建立了 标．峰面积为纵坐标绘制标准 曲线。 空 白羊肌 肉、肝脏、脂肪 5．0g，添加一 替米考星在羊组织中的高效液相色 1．6 组织样品前处理 将羊肌肉、肝 定体积的标准添加溶液 ．使肌肉中药 谱检澳0方法 脏 、脂肪剪碎 ，13000r／min匀浆 2 物浓度为 0．01、0．1和 5．O g／g；肝脏 中 l 材料和方法 min．一20℃冰箱保存备用 准确称取 药物浓度为0．05、O．5和5 g／g；脂肪 1．1 试 剂 替 米 考 星 标 准 品 5．0g羊肌 肉、肝脏 、脂肪组织 ，置于 中药物浓度为 0．03、0．3和 3 g／g；添 (93．2％)，中国兽药监察所；纯水为双 50ml离心管中．加入 10ml甲醇 ，涡动 加后涡动混匀 ．静置 30min按上述样 蒸水：乙酸铵 ．分析纯 ，北京化学试剂 5min使样 品彻底悬浮 ．3500r／min离 品前处理方法分别处理后 HPLC测 公司；乙腈 ，甲醇 ，色谱纯 ，北京化学 心 10min f精确的离心速度和离心的 定 ．一天中每个浓度取五个平行样 试剂公司。 时间并不重要．要求上清液清亮 ．组 品．分别测定．计算 回收率和 日内变 1．2 主要溶液配制 HPLC流动相 织沉淀)．将上清液转移到 lOOml离 异系数。 一 的配制：0．1mol／L乙酸铵f甲酸调 PH 心管中 向组织凝块的离心管中加入 2 结果 至05．0)一乙腈一甲醇 (60—30—10)，