转铁蛋白修饰的阿霉素隐形脂质体的制备及体外细胞试验.pdfVIP

转铁蛋白修饰的阿霉素隐形脂质体的制备及体外细胞试验 李学明 ，丁丽燕 ，顾 立 ，周维娜 ，平其能 m 叶 ( 中国药科大学药剂学教研室，南京210009； 南京工业大学制药与生命科学学院，南京210009) ● C n 摘 要 目的：用转铁蛋白(Tf)修饰盐酸阿霉素隐形脂质体(sL)，以增加药物在肿瘤部位的积蓄，从而增加药物向肿 n a 瘤细胞内的转运。方法：采用薄膜超声法制备空白脂质体，硫酸铵梯度法装载盐酸阿霉素(DOX)；通过膜材 DSPE— ● P n PEG2000一COOH上的活性羧基末端与．rf上的氨基连接制备Tf修饰的隐形脂质体(TgSL)；采用凝胶柱一uV法测定脂质体中 DOX的包封率，双辛丁酸试剂盒测定蛋白结合效率；通过流式细胞试验和激光共聚焦显微试验考察肝癌细胞HepG2对sL n 中 岍 包封的DOX(DOX·SL)及 rf_sL包封的DOX(Tf-DOX—SL)的结合或摄取情况，并观察两种脂质体对HepG2细胞的体外杀伤 圄 {8 作用。结果：Tf-DOX—SL的平均粒径为(62±17)nm，药物平均包封率为96．4％，蛋白结合效率为100．28 txg Tf／lxmol磷脂。 票．砉 与DOX—SL相比，Tf-DOX—SL与肝癌细胞HepG2的结合及摄取均增加。48 h细胞毒试验表明Tf_DOX—SL对HepG2细胞的 种 杀伤作用(IC =20．4 Ixmol／L)明显优于DOX—SL(IC =166．2 p~mol／L)(P0．01)。结论：Tf修饰的隐形脂质体可作为肿 瘤靶向的载体通过受体介导的方式促进DOX向肿瘤细胞内的传递。 夫．耋 擎学 y 关键词 阿霉素；隐形脂质体；转铁蛋白；受体介导；体外细胞实验 中图分类号 R944 文献标识码 A 文章编号 1000—5048(2008)02—0111—05 报 加 吣 Preparation of doxorubicin—·loaded stealth liposomes modified with transferrin and／n vitro celI research LI Xue—ming ’ ，DING Li—yan ，GU Li ，ZHOU Wei—na ，PING Qi—neng 一 Department of Pharmaceutics，China Pharmaceutical University,Nanjing 210009； 。College of Life Science and Pharmaceutical Engineering,Nanfing University of Technology,Nanjing 210009，China Abstract Aim：T0 investigate the possibility of using stealth liposomesf SL)modified with transferrin f Tf)as a targeting carrier to increase the accumulation of doxorubicin f DOX1 in tumor and hence enhance intracellular delivery of the encapsulated DOX．Methods：Liposomes containing DOX were prepared by film dispersion fol— lowed by ammonium sulfate gradient method．Tf—DOX—SL were prepared by binding free amino groups of Tf to carboxylic groups of DSPE—PEG2000一COOH．The entrapment efficiency of Tf—DOX．SL was determined by Sepha— dex G-50一UV．The average concentration of Tf coniugated to the liposomes was determined with a bicinchonic acidf BCA1