五个3鄄酮脂酰acp 合成酶同源蛋白的功能鉴定 - 生物化学与生物物理 .pdf

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2014, 4 1(9): 887~895 五个 酮脂酰 合成酶同源蛋白的功能鉴定* 3 ACP 金成 邓丽婷 童文华 朱 磊 王海洪** (华南农业大学生命科学学院，广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室，广州5 10642) 摘要 大肠杆菌的FabB 和FabF 均具有长链3- 酮基脂酰ACP 合成酶活性 除参与长链饱和脂酰链的延伸外，FabB 还是合 成不饱和脂肪酸的关键酶之一，参与不饱和脂酰ACP 的从头合成，最终生成顺-9- 十六烯脂酰ACP 而FabF 只能将顺-9- 十六烯脂酰ACP 延伸为顺-11- 十八烯脂酰ACP ，不参与不饱和脂酰ACP 的从头合成 有研究表明，粪肠球菌、乳酸乳球 菌、丙酮丁醇梭菌和茄科雷尔氏菌等细菌的FabF 同源蛋白，具有类似大肠杆菌FabB 和FabF 的双功能 为证实该现象是否 普遍存在，本研究选取了枯草芽孢杆菌Bsf abF、中 苜蓿根瘤菌Smf abF、霍乱弧菌 Vcf abF、铜绿假单胞菌Paf abF1 和 Paf abF2 5 个同源基因进行功能鉴定，体外酶学分析表明，5 个FabF 同源蛋白均具有长链3- 酮基脂酰ACP 合成酶活性，异 体互补大肠杆菌CL28 的脂肪酸组分分析显示，Smf abF、Vcf abF、Paf abF1 和Paf abF2 具有3- 酮脂酰ACP 合成酶 (FabF)活 性，遗传互补大肠杆菌温度敏感突变株CY242 和CY244 的研究显示，仅有Paf abF2 编码的蛋白拥有3- 酮脂酰ACP 合成 酶 (FabB)活性，能互补大肠杆菌 的突变 这表明不是所有的FabF 同源蛋白均具有3- 酮脂酰ACP 合成酶 和 的双 玉 f abB 玉 重活性 关键词 细菌脂肪酸合成，3- 酮基脂酰ACP 合成酶 ，3- 酮脂酰ACP 合成酶 ，遗传互补 玉 学科分类号 Q93 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 14.00044 脂肪酸合成是细菌主要的基础代谢之一，与细 酰ACP 而FabF 不参与不饱和脂酰ACP 的从头 [1] 菌的生命活动密切相关 研究证明细菌的脂肪酸 合成，但能将顺-9- 十六烯脂酰ACP 延伸为顺- 11- 合成机理高度保守，一般均采用 型脂肪酸合成途 十八烯脂酰ACP，在随温度变化调节细胞脂肪酸 径 其特点是每一步生化反应均由独立的酶蛋白催 组成中起关键作用[6-7] FabB 同源蛋白仅存在于变 化[1-2] 其中，3- 酮脂酰ACP 合成酶催化脂酰ACP 形菌门(Proteobacteria) 的 和 群中，而FabF 琢 酌 [3] (或乙酰CoA) 与丙二酸单酰ACP 的聚合，是细菌 的同源蛋白却在细菌中普遍存在 ，且表现出与大 [3] 脂肪酸合成关键酶 在不同细菌中该合成酶的蛋 肠杆菌 FabF 不同的功能 如 粪肠球菌 白质序列同源性较高，但在存在 型和脂酰链的延 (Enterococc us f aecal