基于真空lhpef结合胰蛋白酶降解猪血红蛋白.pdf

第 １９卷第３期 激　光　生　物　学　报 Ｖｏｌ．１９Ｎｏ．３ 　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 ２０１０年６月 ＡＣＴＡ　ＬＡＳＥＲ　ＢＩＯＬＯＧＹ　ＳＩＮＩＣＡ Ｊｕｎｅ．２０１０ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７７１４６．２０１０．０３．０１６ 基于真空ＬＨＰＥＦ结合胰蛋白酶降解猪血红蛋白 １ ２ ３ ４ 张　滨 ，马美湖 ，杨　华 ，向　华 （１．长沙环境保护职业技术学院环境科学系，湖南长沙４１０００４；２．华中农业大学食品科技学院，湖北 武汉４３００７０； ３．湖南农业大学生物科技学院，湖南长沙４１０１２８；４．长沙百进生物有限公司，湖南长沙４１０１２７） 摘　要： 在真空及低压高频脉冲（ＬＨＰＥＦ）条件下，结合胰蛋白酶降解猪 Ｈｂ，利用高效凝胶色谱、ＮａｔｉｖｅＰＡＧＥ 蛋白电泳及紫外扫描来测定其降解效果。结果表明在３７℃温度下，１．８８Ｖ、２００ｋＨｚ的ＬＨＰＥＦ处理猪Ｈｂ，电导 ５ ４ 率为３．４５３２６×１０ ｓ／ｃｍ（对照组为０．６４５×１０ ｓ／ｃｍ）。紫外扫描曲线图中的真空ＬＨＰＥＦ胰蛋白酶降物中有 μ μ ８个特征吸收峰，而对照组中为６个吸收峰，ＮａｔｉｖｅＰＡＧＥ蛋白质电泳图中有１３个明显色带，而对照组中只有６ 个色带，高效凝胶色谱图中的特征吸收峰为４８个，对照组中７个特征吸收峰。 关键词： 低压高频脉冲电场 （ＬＨＰＥＦ）；胰蛋白酶；猪血红蛋白；降解 中图分类号： ＴＳ２５１．９３ 文献标识码： Ａ 文章编号： １００７７１４６（２０１０）０３０３８００５ ＰｏｒｃｉｎｅＨｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（Ｈｂ）ＴｒｙｐｓｉｎＤｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｎ ＶａｃｕｕｍａｎｄＬＨＰＥＦ １ ２ ３ ４ ＺＨＡＮＧＢｉｎ，ＭＡＭｅｉｈｕ ，ＹＡＮＧＨｕａ，ＸＩＡＮＧＨｕａ （１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＣｈａｎｇｓｈａＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌａｎｄＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００４， Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７０，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ； ３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ； ４．ＣｈａｎｇｓｈａＢａｉｊｉｎｇＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２７，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： ｐｒｏｒｃｉｎｅｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ（Ｈｂ）ｗａｓｄｅｇｒａｄｅｄｂｙｔｒｙｐｓｉｎｉｎｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｖａｃｕｕｍａｎｄｌｏｗｖｏｌｔａｇｅｈｉｇｈｆｒｅ ｑｕｅｎｃｙｐｕｌｓｅｅｌｅｃｔｒｉｃｆｉｅｌｄ（ＬＨＰＥＦ），Ｈｂ’ｓｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．ｂｙｔｈｅｕｓｅｏｆｈｉｇ