三种不同灭活方法对新城疫病毒血凝和rtrpcr试验 - 中国兽药杂志.pdf

　２０１６，５０（９）：１１～１４／陈羽琪，等 中国兽药杂志 ·１１· 三种不同灭活方法对新城疫病毒血凝和 ＲＴ－ＰＣＲ试验结果的影响 １，２ １ １ １ １ １ 陈羽琪 ，南文龙 ，秦立得 ，巩明霞 ，张悦勇 ，陈义平 （１．中国动物卫生与流行病学中心诊断试剂研究室，山东青岛２６６０３２；２．西交利物浦大学生物科学系，江苏苏州２１５１２３） ［收稿日期］２０１６－０７－２３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００２－１２８０（２０１６）０９－００１１－０４　［中图分类号］Ｓ８５２．６５ ［摘　要］　为研究热灭活、甲醛、 －丙内酯（ＢＰＬ）三种不同灭活方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）血凝和 β ＲＴ－ＰＣＲ试验结果的影响，将收获的ＮＤＶ鸡胚尿囊液分别用浓度为０．１％～０．５％的甲醛３７℃灭 活２４ｈ或４℃灭活４８ｈ、浓度为０．０２％～０．２％的ＢＰＬ３７℃灭活９ｈ、６０℃热灭活３０～９０ｍｉｎ，并 于灭活前后进行血凝试验和ＲＴ－ＰＣＲ检测。结果表明，用０．０２％的ＢＰＬ３７℃灭活９ｈ或０．１％的 甲醛４℃灭活４８ｈ，不影响ＮＤＶ的血凝价；采用热灭活３０ｍｉｎ或０．０２％的ＢＰＬ３７℃灭活９ｈ，不影 响ＮＤＶ核酸检测。本研究可为相关病原检测以及诊断制品制备过程中灭活方法的选择提供参考。 ［关键词］　新城疫病毒；灭活；血凝；ＲＴ－ＰＣＲ ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＴｈｒｅｅＤｉｆｆｅｒｅｎｔＩｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓｏｎ ＮｅｗｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓＨｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎＴｅｓｔａｎｄＲＴ－ＰＣＲＡｓｓａｙ １，２ １ １ １ ＣＨＥＮＹｕ－ｑｉ ，ＮＡＮＷｅｎ－ｌｏｎｇ，ＱＩＮＬｉ－ｄｅ，ＧＯＮＧＭｉｎｇ－ｘｉａ， １ １ ＺＨＡＮＧＹｕｅ－ｙｏｎｇ，ＣＨＥＮＹｉ－ｐｉｎｇ （１．ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎａＡｎｉｍａｌＨｅａｌｔｈａｎｄＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙＣｅｎｔｅｒ，Ｑｉｎｄａｏ，Ｓｈａｎｇｄｏｎｇ２６６０３２，Ｃｈｉｎａ； ２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｘｉ’ａｎＪｉａｏｔｏｎｇ－ＬｉｖｅｒｐｏｏｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１５１２３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｎＮｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ （ＮＤＶ）ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ（ＨＡ）ｔｅｓｔａｎｄＲＴ－ＰＣＲａｓｓａｙ，ｖｉｒａｌｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓｗｅｒｅｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄｂｙ０．１％ ～０．５％ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅｆｏｒ３７℃２４ｈａｎｄ４℃４８ｈ，０．０２％～０．２％ －ｐｒｏｐｉｏｌａｃｔｏｎｅ（ＢＰＬ）ｆｏｒ３７℃９ｈａｎｄ６０℃ β ｗａｔｅｒｂａｔｈｆｏｒ３０～９０ｍｉｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｎｔｈｅｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＨＡｔｅｓｔａｎｄＲＴ－ＰＣＲａｓｓａｙ． ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒＨＡｗｅｒｅ０．０２％ ＢＰＬａｔ３７℃ ｆｏｒ９ｈｏｒ０．１％ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅａｔ４℃ｆｏｒ４８ｈ；ｆｏｒＲＴ－ＰＣＲｗｅｒｅ６０℃ｗａｔｅｒｂａｔｈｆｏｒ３０ｍｉｎｏｒ０．０２％ ＢＰＬａｔ３７℃ｆｏｒ９ｈ． Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙｐｒｏｖｉｄｅｄｓｕｇｇｅｓｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉ