应用混料设计优化发酵废羽毛生产蛋白饲料的复合菌剂配比.pdf

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０１６（０７上）：１５４－１５６，２７９－２８０ 应用混料设计优化发酵废羽毛生产 蛋白饲料的复合菌剂配比 张誉耀，尹军霞，陈　璐，曹云霞，吴礼杰，张泽民 （绍兴文理学院生命科学学院，浙江 绍兴３１２０００） 中图分类号：Ｓ８１６．４ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００４－７０３４（２０１６）０７－０１５４－０５ 关键词：混料设计；复合菌剂；羽毛；角蛋白酶；可溶性蛋白；单一菌剂；回归方程；氨基酸 摘　要：为了确定４株（Ｂｄ１、Ｚｂ１１、Ｚｂ４、Ｚｂ５）具有高效协同降解羽毛效果的菌株组成复合菌剂的最佳 配比，试验采用混料（Ｍｉｘｔｕｒｅ）设计方法，对４株菌的单一菌剂配比进行优化组合，用Ｄｅｓｉｇｎ－Ｅｘｐｅｒｔ ８．０软件建立回归方程和模型，考查各组分间的交互作用，测定了复合菌剂中Ｂｄ１、Ｚｂ１１、Ｚｂ４、Ｚｂ５的 最优配比。结果表明：Ｂｄ１、Ｚｂ１１、Ｚｂ４、Ｚｂ５的最优配比为１０．０％、４７．５％、３２．５％、１０．０％，此配比下 液态发酵产物中可溶性蛋白含量、角蛋白酶活性分别为０．８９２ｍｇ／ｍＬ、１５．８２Ｕ／ｍＬ，与预测值相符；利用 复合菌剂固态发酵废羽毛生产的蛋白饲料中可溶性蛋白和氨基酸含量分别为２７．６，１８７．４２ｍｇ／ｇ。 ［９］ 　　随着渔业、畜牧业的不断发展，我国饲料资源，尤 解羽毛效果的菌株 ，拟应用混料试验设计方法研 ［１］ 其是动物性蛋白饲料资源的缺乏日趋严重 。然 究４株菌组成的复合菌剂的最佳配比，为复合菌剂的 而，我国每年家禽加工业以及羽绒制品生产企业所产 推广应用奠定基础，现报道如下。 ［２］ 生的羽毛副产物在百万吨以上 。羽毛角蛋白可以 １　材料与方法 转化为易被动物消化吸收的氨基酸，羽毛粉可以替代 １．１　菌种 或者部分替代鱼粉用作动物饲料［３－４］。采用传统物 绍兴文理学院微生物实验室分离鉴定的４株具 理、化学方法处理羽毛制备蛋白饲料存在耗能大、产 ［９］ 有协同降解角蛋白的菌株 ，分别为土壤短芽孢杆 品营养易被破坏、三废不易处理、环境污染严重等问 菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓａｇｒｉ，Ｂｄ１）、嗜烟碱节杆菌（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔ 题［５］。微生物发酵羽毛生产蛋白饲料是近几年来国 ｅｒｎｉｃｏｔｉｎｏｖｏｒａｎｓ，Ｚｂ１１）、粪产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｆａｅ 内外兴起的开发羽毛角蛋白资源的方法［６－８］。绍兴 ｃａｌｉｓ，Ｚｂ４）、萎缩芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｔｒｏｐｈａｅｕｓ，Ｚｂ５）。 文理学院生命科学学院Ｂ２０２实验室从长期堆积腐 １．２　培养基 烂羽毛的土壤、鸡粪便中分离到４株具有高效协同降 种子培养基：酵母膏５ｇ、蛋白胨 １０ｇ、氯化钠 １０ｇ、纯化水１０００ｍＬ，ｐＨ值为７．５。 发酵培养基：羽毛１０ｇ、磷酸二氢钾０．５ｇ、磷酸 收稿日期：２０１５－０７－３０；修回日期：２０１５－０８－２２ 基金项目：浙江省大学生科技创新活动计划项目（２０１４Ｒ４２６０ 氢二钾１．２ｇ、氯化钠０．５ｇ、硫酸镁０．１ｇ、氯化钙 １２）；绍兴市公益性技术应用研究计划项目（２０１２Ｂ７００３１） ０．２ｇ、纯化水１０００ｍＬ，ｐＨ值为７．０。 作者简介：张誉耀（１９９４－　），男，本科生，５１５８０７８２５＠ｑｑ． 固体发酵培养基：２５０ｍＬ三角瓶中加 １０ｇ羽毛 ｃｏｍ．