天府肉鹅ifn-α成熟肽基因的原核表达及抗病毒活性 - 四川农业大学学报.pdf

29 　 2 Vol.29　No.2 　2011 6 　 　 　 Journal of Sichuan Agricultural University 　 　 Jun.2011 doi:10.3969/j.issn.1000-2650.2011.02.025 IFN-α 1, 2 1 1,2 1, 2 1, 3 1 1 1 刘　菲 , 高丽芹 , 程安春 , 汪铭书 , 韩清林 , 赵婷婷 , 唐卫杰 , 严晓玲 (1.四川农业大学动物医学院, 四川雅安　625014; 2.动物疫病与人类健康四川省重点实验室, 四川雅安　625014;　3.四川省大英县畜牧局, 四川大英　62911 ) :参 已克隆的天府肉鹅IFN-α完整ORF 基因序列设计引物, 克隆成熟肽基因, 与载体pET32a 连接, 构建原 核表达载体, 并在表达菌Rosetta 中表达, SDS分析鉴定, 通过 Ni-IMAC 亲和层析纯化和稀释透析复性后, 采用微量细胞病变抑制法分析测定IFN 的抗病毒活性。结果显示, IFN-α成熟肽基因全长4 6 bp, 共编码161 个氨 基酸;成功构建了原核表达载体pET32a-mGoIFN-α并得到表达, SDS和Western-blot 分析表达蛋白的大小 3 为 3 ku;纯化复性后的表达蛋白抗水泡性口炎病毒(VSV)活性的比活力为5.52×10 U/mg, 表明重组蛋白具有良 好的抗病毒活性。 :天府肉鹅;α干扰素;原核表达;抗病毒活性;水泡性口炎病毒 :S 35;S 52.4 　　:A　　:1000-2650(2011)02-0269-05 Prokaryotic Expression of Tianfu Goose IFN-αMature Peptide and its Activity Against Virus 1,2 1 1,2 1,2 LIU Fei , GAO Li-qin , CHENG An-chun , WANG Ming-shu , 1, 3 1 1 1 HAN Qing-lin , ZHAO Ting-ting , TANG Wei-jie , YAN Xiao-ling (1.College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Yaan 625014, Sichuan, China; 2.Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province, Yaan 625014, Sichuan, China; 3.Bureau of Animal H usbandry of Daying Country of Sichuan Province, Daying 62911 , Sichuan, China) Abstract:A primer w as designed reference to the complete OR F of Tianfu goose IFN-α, the ma-