白藜芦醇对uva照射hacat细胞的防护效应及其机制!.pdfVIP

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白藜芦醇对uva照射hacat细胞的防护效应及其机制!.pdf

第 35 卷 第 2 期 辐射研究与辐射工艺学报 J. Radiat. Res. Radiat. Process. Vol.35, No.2 2017 年 4 月 /fushe/CN/volumn/home.shtml April 2017 白藜芦醇对 UVA 照射 HaCaT 细胞的 防护效应及其机制 李 辰 王春燕 田 梅 齐雪松 邵 帅 苟 巧 (中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室 北京 100088 ) 摘要 采用 Cell Counting Kit-8 (CCK-8 试剂盒)检测 HaCaT 细胞的增殖水平。Annexin V-FITC/PI 流式细胞 术检测 HaCaT 细胞的凋亡率和死亡率。单丹磺酰尸胺(Monodansylcadaverine, MDC)荧光染色和二氯荧光黄二 乙酸酯(Dichlorodihydrofluorescein diacetate, DCFH-DA)探针标记后,用激光共聚焦显微镜进行扫描,分别检测 HaCaT 细胞内自噬体和活性氧(Reactive oxygen species, ROS)水平变化。Western blot 检测 HaCaT 细胞内 2 LC3B-II 、磷酸化AKT(p-AKT)和总 AKT 蛋白表达变化。结果显示:经 10~80 J/cm UVA 照射后,HaCaT 细胞 的增殖水平随受照剂量的增加逐渐降低(p 0.05) ;白藜芦醇预处理能显著促进 UVA 照射后 HaCaT 细胞增殖 (p 0.01) ,降低其凋亡率和死亡率(p 0.05) ;经20 J/cm2 UVA 照射后 3~24 h,HaCaT 细胞内 LC3B-II 蛋白表达 增强(p 0.01) ;白藜芦醇预处理能使 UVA 照射后 HaCaT 细胞内自噬增强(p 0.01) ,ROS 水平降低(p 0.01) , p-AKT 蛋白表达增强(p 0.01) 。提示白藜芦醇可能通过促进细胞自噬和AKT 蛋白磷酸化,以及降低细胞内ROS 水平,拮抗 UVA 导致的 HaCaT 细胞增殖抑制、凋亡和死亡。 关键词 白藜芦醇,HaCaT 细胞,UVA ,防护效应 中图分类号 TL75 DOI: 10.11889/j.1000-3436.2017.rrj.35.020201 Protective effect of resveratrol on UVA-irradiated HaCaT cells and its mechanism LI Chen WANG Chunyan TIAN Mei QI Xuesong SHAO Shuai GOU Qiao (National Institute for Radiological Protection, Key Laboratory of Radiological Protection and Nuclear Emergency, Chinese Center for Dise

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