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乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞干扰素调节因子3表达变化的研究
中文摘要
目的:
通过观察乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞干扰素调节因子3表达
的变化,探讨HBV持续感染分子免疫机制。
方法:
采用细胞滤网过滤、Percoll密度梯度离心和免疫磁珠分选法分离肝脏树
突状细胞,并用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子和白介素4诱导培养。将树突
状细胞分为两组:一组与HBV共培养,另一组加入等量的细胞培养液作为正常
I:C刺激,收集不同时间点细胞和上清,留
对照组。24h后,两组均加入Poly
细胞培养液作为空白对照,用western
blot检测IRF3表达,用ELISA法检测上
清中IFN—B浓度。
结果:
1.DC与HBV共培养前,IRF3表达弱。用polyI:C刺激DC后,IRF3表
I:
达明显增加,呈时相性,在2—6h达到高峰。DC与HBV共培养后,再用poly
C刺激,IRF3表达的时相性不明显,未见明显升高。DC表达IRF3的能力与病
毒载量有关,高病毒载量能明显抑制IRF3表达,病毒载量低于106copies/ml
时差异不明显。
组(10.83±4.11
I:C刺激后6h,HBV组培养液上清IFN-B浓度(88.67±9.01pg/m1)与正常对
照组(137.68±12.28pg/m1)相比,差异有统计学意义(t=9.653,PO.01)。
Poly
I:C刺激后24h,HBV组培养液上清IFN—B浓度(69.89±5.80pg/m1)与
正常对照组(72.25-+8.61
pg/m1)相比,差异无统计学意义(t=O.6820,乃O.05)。
结论:
1.用polyI:C刺激正常DC后,IRF3表达增加,呈时相性。
2.HBV干预后,用polyI:C刺激DC后,IRF3表达增加不明显。高载量
HBV能明显抑制肝脏树突状细胞IRF3的表达。
3.HBV干预后,肝脏树突状细胞IRF3下游IFN—B表达降低。
关键词:
乙型肝炎病毒,树突状细胞,干扰素,干扰素调节因子3,小鼠,肝脏
中图分类号:R512.6+2
2
ABSTRACTS
objectives:
To themolecule mechanismofHBV
investigate immunology persistent
the ofIRF3inroutineliver
observed dendritic
infection,we expression cells,which
HBV
wereintervenedvirions.
by
Methods:
Themurineliverdendriticcellswereisolatedviaanti-CD1lcmicrobeads.and
GM—CSFandIL一4toinducethe and
wereincubated谢th DCs
generation
weredividedintotwo wasculturedwitllHBV
proliferation.DCs groups.Onegroup
other was withoutHBVasa
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