乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞干扰素调节因子3表达变化的研究.pdfVIP

乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞干扰素调节因子3表达变化的研究.pdf

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乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞干扰素调节因子3表达变化的研究

中文摘要 目的: 通过观察乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞干扰素调节因子3表达 的变化,探讨HBV持续感染分子免疫机制。 方法: 采用细胞滤网过滤、Percoll密度梯度离心和免疫磁珠分选法分离肝脏树 突状细胞,并用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子和白介素4诱导培养。将树突 状细胞分为两组:一组与HBV共培养,另一组加入等量的细胞培养液作为正常 I:C刺激,收集不同时间点细胞和上清,留 对照组。24h后,两组均加入Poly 细胞培养液作为空白对照,用western blot检测IRF3表达,用ELISA法检测上 清中IFN—B浓度。 结果: 1.DC与HBV共培养前,IRF3表达弱。用polyI:C刺激DC后,IRF3表 I: 达明显增加,呈时相性,在2—6h达到高峰。DC与HBV共培养后,再用poly C刺激,IRF3表达的时相性不明显,未见明显升高。DC表达IRF3的能力与病 毒载量有关,高病毒载量能明显抑制IRF3表达,病毒载量低于106copies/ml 时差异不明显。 组(10.83±4.11 I:C刺激后6h,HBV组培养液上清IFN-B浓度(88.67±9.01pg/m1)与正常对 照组(137.68±12.28pg/m1)相比,差异有统计学意义(t=9.653,PO.01)。 Poly I:C刺激后24h,HBV组培养液上清IFN—B浓度(69.89±5.80pg/m1)与 正常对照组(72.25-+8.61 pg/m1)相比,差异无统计学意义(t=O.6820,乃O.05)。 结论: 1.用polyI:C刺激正常DC后,IRF3表达增加,呈时相性。 2.HBV干预后,用polyI:C刺激DC后,IRF3表达增加不明显。高载量 HBV能明显抑制肝脏树突状细胞IRF3的表达。 3.HBV干预后,肝脏树突状细胞IRF3下游IFN—B表达降低。 关键词: 乙型肝炎病毒,树突状细胞,干扰素,干扰素调节因子3,小鼠,肝脏 中图分类号:R512.6+2 2 ABSTRACTS objectives: To themolecule mechanismofHBV investigate immunology persistent the ofIRF3inroutineliver observed dendritic infection,we expression cells,which HBV wereintervenedvirions. by Methods: Themurineliverdendriticcellswereisolatedviaanti-CD1lcmicrobeads.and GM—CSFandIL一4toinducethe and wereincubated谢th DCs generation weredividedintotwo wasculturedwitllHBV proliferation.DCs groups.Onegroup other was withoutHBVasa

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