缓冲液匀浆法和丙酮浸提法提取杨桃过氧化酶的研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sei．2012。40(11)：6486—6487。6575 责任编辑 郑丹丹 责任校对 况玲玲 缓冲液匀浆法和丙酮浸提法提取杨桃过氧化酶的研究 景艳艳 ，杨昌鹏 ， ，何新华 (1．广西大学农学院，广西南宁53oo04；2．广西农业职业技术学院，广西南宁530007) 摘要 [目的]为杨桃果实过氧化物酶(POD)的分离纯化提供理论依据。[方法]用缓冲液匀浆法和丙酮浸提法对杨桃POD进行提取， 并比较其提取的效果。[结果]用缓冲液匀浆法提取杨桃 POD的最佳条件为：PVPP浓度 1．O％、提取时间4h、pH7．0；用丙酮浸提法提 取杨桃POD的最佳条件为：丙酮浓度9o％、丙酮浸提时间30min、料液比1：4g／ml。[结论]经比较，用丙酮浸提法提取的杨桃POD的比 活性远大于缓冲液匀浆法，约是后者的15倍。在提取杨桃POD时，宜选用丙酮提取法。 关键词 杨桃 ；过氧化物酶；提取 中图分类号 S667．9 文献标识码 A 文章编号 o517—66l1(2012)11—06486—02 StudyontheExtractionofPeroxidaseinCarambola(Averrhoacarambola)byHomogenateBufferandAcetoneExtraction J】NG Yan-yanetal (CollegeofAgriculture，GuangxiUniversity，Nanning，Guangxi53ooo4) A~traet O『bieetive1111eaimwastoprovidethetlleoreticalbasisfortlleseparationandpurificationofperoxidase(P0D)incraambolafruit． 『Method]ThePODincarambolawasextractedusinghomogenatebufferandacetoneextraction，andtheextractioneffectswerecompared．fRe． suit]TheoptimalconditionsofrstarfruitP0DbyhomogenatebufferwerePVPPconcentrationof1．0％，extractiontimeof4h，pHof7．0：and hteoptimalconditionsofrstra fruitp0Dbyacetoneextractionwereacetoneconcentrationof90％ ，acetoneextractiontimeof30min．solid．1iquid radioof1：4 m1．[ConclusionlTheacetoneextractionwasbetterthanhomogenatebufferbycomparingthetwomethods。whichwasabout15 timeshtna htelatter．Therefore．theextractionofpemxidaseineraambolashouldselecttheacetoneextractionmethod． Keywords Craambola：Peroxidase：Extraction 杨；~(Averrhoacarambola)为酢浆草科五敛子属植物 ，属 学院的果树大棚。 南方热带名果之一。由于杨桃皮薄 肉脆 ，具棱角、易损伤 ，在 1．1．2 试剂。Folin＆CioealtecusPhenol(美国Sigma公司)、 贮运尤其在加工过程中容易发生褐变和腐烂变质，从而影响 30％过氧化氢 (AR)、愈创木酚 (AR)、Tween80(聚氧乙烯脱 其外观品质和营养品质，使其商品价值降低，货架期缩短。 水山梨醇单油酸酯；乳化剂 T80)、TritonX．100(聚乙二醇辛 因此，防止杨桃褐变成为亟待解决的问题。 基苯基醚)、PVPP(交联聚乙烯吡咯烷酮)、磷酸氢二钠 在酶促褐变中，多酚氧化酶(PPO)是引起果蔬褐变的关 (AR)、磷酸二氢钠(AR)等。 键酶类，近年来另一氧化还原酶即过氧化物酶 (POD)在果蔬 1．1．3 仪器 。GL-16G—I1型高速冷冻离心机 (上海安亭科学