黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响.pdfVIP

时珍国医国药2012年第23卷第4期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2012VOL．23NO．4 黄连温胆汤对 2型糖尿病小鼠学习记忆 及海马神经细胞形态的影响 张卫华 ，刘 舟 ，石富国 ，陈志明 (1．南京中医药大学，江苏 南京 210046； 2．中国药科大学2009级硕士研究生，江苏 南京 211198) 摘要 ：目的研究黄连温胆汤对2型糖尿病小鼠学习记忆及海马神经细胞形态的影响。方法 小鼠喂养高糖、高脂、高热 量饲料4周后，腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)100mg／kg，制备糖尿病小鼠模型，随机分为二 甲双胍 阳性对照组，模型对照 组，黄连温胆汤低、中、高剂量组。黄连温胆汤低中高剂量组，分别给黄连温胆汤5，10，20 (按生药量计)。阳性药组 给予二 甲双胍 250mg／kg。连续给药3周后进行跳台实验和水迷宫实验，海马组织HE染色光镜观察。结果 黄连温胆汤 中、高组、二甲双胍组与模型组比较，小鼠潜伏期明显减低，而错误次数明显减少。黄连温胆汤中、高剂量组海马神经细 胞损伤程度较低剂量组轻。结论 黄连温胆汤对糖尿病 小鼠学习记忆有明确改善作用，且可以减轻海马神经元细胞损 伤 。 关键词：黄连温胆汤；糖尿病； 学习记忆；病理 DOI标识 ：doi：10．3969／i．iSSn．1008-0805．2012．04．073 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：B 文章编号：1008-0805(2012)04-0948-02 黄连温胆汤是临床有效方剂，由黄连、竹茹、半夏、枳实、陈 料，共喂养4周。4周后 ，高脂高糖饲料喂养组禁食不禁水 14h， 皮 、茯苓、甘草 、生姜组成，具有清热化痰、理气和中的功效。有临 腹腔注射 STZ100mg／kg整个操作在冰浴上进行，且保证整个注 床报道0’，黄连温胆汤治疗糖尿病、血管性痴呆取得 了较好的 射过程在 15rain内完成。注射 72h后 ，禁食不禁水 12h，采用葡 效果。本文采用动物模型，研究黄连温胆汤的对2型糖尿病小鼠 萄糖氧化酶法测量小鼠空腹血糖 ，空腹血糖值 11mmol／L者为 学习记忆及海马神经细胞形态的影响。现报道如下。 糖尿病小鼠，去除血糖值不达标小鼠，按照血糖值随机分为二甲 1 材料与仪器 双胍阳性对照组 ，模型对照组，黄连温胆汤低剂量组、中剂量组和 1．1 药物与试剂 二甲双胍 ，规格0．25g，090529B，生产厂家：上 高剂量组。 海医药(集团)有限公司信宜制药厂。黄连温胆汤组成药物均购 2．1．2 给药 黄连温胆汤共 3个剂量组，给药剂量分别低剂量5 于南京先声药店丁家桥店，并经中国药科大学中药资源开发教研 ， 中剂量 10 ，高剂量20 kg(按生药量计)。阳性药组 ： 室秦民坚教授鉴定。药物浸泡30rain后 ，加8倍量的双蒸水，从 二甲双胍 ，给药剂量为250mg／kg。灌 胃给药组均连续灌胃给药 煮沸起计时 1h。倒出药液后，重复加4倍水煎煮0．5h两次。 3周，给药期间仍然以高营养饲料喂养。 药液用8层纱布过滤2次，60℃水浴旋蒸至浓度为2g／ml(按生 2．2 观测指标及检测方法 药量计算)，4℃保存。链脲佐菌素 (STZ)，购于美国sigma公司，2．2．1 学习记忆实验 动物给药3周后 ，进行学习记忆实验。 批号S一0130；临用前以预冷的柠檬酸缓冲液将 STZ粉末溶解 ， 跳台：将小鼠放入反应箱 内适应环境 3rain，然后立即通 以 配成 1％的STZ溶液。葡萄糖测定试剂盒，购于南京建成有限公 36V交流电，训练5min并记录错误次数 ，以此作为学习成绩。 司，批号上海荣盛生物药业有限公司生产。饲料为高 24h后重作测试，记录第一次跳下平台的潜伏期和5rain内错误 糖、高脂、高热量饲料的配方 (蔗糖：猪油：奶粉：鸡蛋：猪胆酸盐： 次数。 普通饲料粉 =30：20：4：2：0．05：63)，由江苏省南京市青龙 通道式水迷宫实验：水迷宫装置为 80cm×50cmx20cm 的 山动物养殖场提供。