黄芪-乳酸菌发酵组合对小鼠免疫功能的增强作用.pdfVIP

时珍国医国药2012年第23卷第4期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2012VOL．23NO．4 黄芪 一乳酸菌发酵组合对小鼠免疫功能的增强作用 罗 霞 ，郑林用 ，余梦瑶 ，魏 巍 ，江 南 ，许晓燕 (1．四川省中医药科学院中药细胞与分子生物学实验室，四川成都 610041； 2．四川省农业科学院，四川 成都 610066) 摘要 ：目的研究黄芪一乳酸菌发酵组合HQ3对小鼠免疫功能的影响。方法 通过小鼠血清溶血素抗体生成试验、小鼠 碳粒廓清试验及 DNFB诱发小鼠皮肤迟发型超敏反应试验，测定发酵组合 HQ3对小鼠免疫功能的影响。同时测定发酵 组合的pH，粗多糖、蛋白质及黄芪甲苷含量。结果 黄芪一乳酸菌发酵组合HQ3能显著有效增强免疫低下模型小鼠抗体 生成免疫(P0．05)、迟发型超敏反应免疫(P0．05)以及 RES吞噬碳粒的巨噬细胞免疫能力(P0．05)。发酵产物 pH 值为(4．4674-0．029)，粗多糖含量为(20．5724-0．550)mr,／ml、蛋 白质为(1．088±0．013)mg／ml、黄芪甲苷含量为(5．925 ±0．ol1)mg／ml。结论 黄芪一乳酸菌发酵组合 HQ3具有增强小鼠免疫力的作用。且三批 中试发酵组合理化性质的 RSD均小于3％，发酵工艺稳定。 关键词 ：乳酸茵；黄芪；免疫增强；发酵；理化性质 DOI标识 ：doi：10．3969／．issn．1008-0805．2012．04．047 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：B 文章编号：1008-0805(2012)04-0894-02 黄芪是传统中医药学中一味重要药材，《中国药典}2010版 任公司)，印度墨汁 (080301，北京市西中化工厂)，二硝基氟苯 规定药闭的黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus (DNFB)成都科龙化工试剂厂)。 (Fisch．)＼Bege．var．mongholicus(Bge．)和膜荚黄芪 Astragalus 智能光照培养箱(ZGX一300C，中国杭州钱龙仪器设备有限 membrantw~s(Fisch．)Bge．的干燥根…，历史记载其具有补气升 公司)，HPLC系统 (Waters1525，Waters公司)，冷冻高速离心机 阳、益气固裁 、生津止渴、托毒生肌和利水消肿等功效。现代医学 (Centrifuge5810R，美国Eppendoff公司)，pH计 (Delta320，梅特 发现其药理悄用甚广，具有增加机体免疫功能、抗肿瘤、固肾降 勒 ·托利多仪器(上海)有限公司)，紫外一可见分光光度计 (T6， 压、保肝抗炎、治疗心血管疾病等功能 J。 中国北京普析通用仪器有限责任公司)。 近年来，有研究通过生物转化的方式，用微生物发酵传统中 2 方法 药，因为在发酵的过程中伴随着某些成分的分解转化，由此可能 2．1 小鼠溶血素抗体生成实验 昆明小鼠，雌雄各半，随机分为 生成影响中药药理作用的新有效成分，达到增效减毒的功能 。正常组、模型组、给药组，每组 1O只。给药组均给以灌胃10g原 目前有报道用微生 发酵黄芪，取得一定成果。魏巍等 研究 生药量／ bw ·d，正常组及模型组给相同体积的水，连续给药 11 表明，灵芝液体发酵黄 具有提高小鼠运动耐力的作用。本研究 d。第5天给药30rain后，每只小 鼠腹腔注射0．2m15％鸡血红细 是利用益生菌一乳酸菌醢酵黄芪，研究其对小鼠免疫功能的影响 胞悬以造成免疫。第5，7，9天，除正常组外小 鼠腹腔注射CY20 作用，同时测定发酵产物的多糖、黄芪甲苷等含量，研究其发酵工 mg／kgbw ·d造成模型。第 11天灌胃30rain后 ，小 鼠眼眶取血 艺的稳定性。 ＼ 20 l置 1ml生理盐水 中，同时加0．5m14％鸡血红细胞0．5ml 1 材料与仪器 、 15％豚血血清于37℃水浴2h，冰浴终止反应，在2000r／min离 1．1 菌株及培养基 乳酸菌菌株：La3，属于乳球菌属(Lactococ 心 10min，取上清液 1ml加入 3ml临配的Hb应用液中，反应 5 c