苯甲酸雌二醇对体外培养毛囊生长和对人皮肤成纤维细胞胶原合成影响.pdfVIP

南京医科大学坝}学似论迁 苯甲酸雌二醇对体外培养的毛囊生长和人皮肤成纤维细胞胶原合成 的影响 研究生 李晓凤 导师 范卫新教授 中文摘要 研究背景： 雌激素是主要由卵巢分泌的类固醇激素，它的主要作用是促进 女性生殖器官的发育和第二性征的出现并维持其正常状态，同时它也 影响全身主要器官系统的功能。皮肤是雌激素发挥作用的最大非生殖 器官。雌激素对各种不同靶器官的生物学活性是由配体的结构、雌激 素受体(ER)亚型等状况来决定‘”。雌二醇是机体中主要发挥作用的 雌激素，而苯甲酸雌二醇是临床上进行激素替代治疗(印订)的主要 药物之一。 雌激素在皮肤中发挥重要的作用，主要表现在：(1)阻止皮肤老 化。 绝经后女性皮肤发生深刻的变化：皮肤松弛和弹性下降、出现 细小皱纹，同时皮肤干燥脱屑、修复功能减退、毛发数量减少等，组 织学表现为：甘油聚糖浓度、水容量、胶原容量下降‘21，这些变化可 以通过局部和系统应用雌激素得到逆转。(2)对皮肤损伤的修复作用。 有人研究认为慢性损伤不易成功修复的原因是白细胞过度增多，胶原 沉积下降。研究认为：局部应用雌激素可明显逆转老年病人损伤修复 变慢的状况。雌激素是一种损伤修复调节因子，在人类乖动物模型中 能逆转年龄相关的损伤愈合队(3)调节毛发生长：对女性AGA病 人局部应用雌二醇苯甲酸酯、雌二醇戊酸酯、17仅／p一雌二醇取得明 显的效果，它使毛发生长期延长、休止期缩短【4J。(4)抑制皮脂腺分 泌。 雌激素主要通过和雌激素受体(ER)相互作用调节信号传导途 径发挥对靶器官的生物学作用。对人皮肤中ER分布的研究表明：ER 在人皮肤中有广泛的分布包括上皮组织的基底层及棘层的角质形成 细胞、毛囊外根鞘的细胞核、上皮基质、毛乳头、内毛根鞘细胞、皮 脂腺及汗腺、真皮的纤维母细胞核【5、6’71。毛囊和成纤维细胞是雌激素 在皮肤中作用的主要靶点之一。 毛囊是一种有周期特性的皮肤附属器官，经历生长期、退行期和 休止期。毛囊不同周期阶段的转换和循环再生是由毛囊角质形成细胞 和毛乳头戍纤维细胞的双向信号传导来控制，许多生长刺激因子和抑 制因子参与了毛囊发育的调节及周期性活动的控制‘81。许多研究表 明：雌激素对毛囊周期调节发挥重要影响。早在70年前，人们就发 现毛发生长和性激素有密切关系：去掉卵巢的豚鼠剪毛后毛发再生速 度明显快于生育期的母鼠‘91。而局部应用雌二醇也表明大鼠、小鼠、 和狗的毛发生长受到抑制㈣。在临床上也观察到妇女怀孕期间毛发脱 落速度变慢，而产后毛发大量脱落。 成纤维细胞是真皮中的主要细胞成分之一。它形成真皮中的胶原 纤维、弹性纤维、基质等。真皮中胶原水平的下降是导致绝经后妇女 皮肤老化外观的主要原因之一。研究表明：应用雌二醇对鼠真皮成纤 维细胞进行培养，发现胶原合成增加约76％【：111。对鼠模型的研究发现： 在光损伤皮肤和正常皮肤组织中，局部雌激素是重要的结缔组织调节 因子，他能利激新的结缔纽织带的形成l”l。有人研究了年龄的老化和 绝经两种因素对皮肤胶原的影响，结果表明，相对于年龄的老化，绝 经对胶原的影响更为显著，表明了激素对胶原合成和表达有非常重要 的意义㈦。 誉课题的研究主要包括以下两个方面： (一)苯甲酸雌二醇对体外培养的毛囊生长的影响 目的：通过对猪毛裳和人毛囊进行体外培养，来观察苯甲酸雌二醇对 毛囊生长的影响。方法：本实验分别采用人毛囊和猪毛囊进行体外培 养。实验分五组：空白对照组、和4个苯甲酸雌二醇浓度组(10nmol厂L、 天通过显微镜测量毛裳生长长度、观察其形态变化。结果：与阴性对 生长受到抑制，培养8天后，毛乳头结构呈现退行性改变。结论：苯 甲酸雌二醇对毛囊生长有明显的抑制作用。 (二)苯甲酸雌二醇及uVA辐照对体外培养的人皮肤成纤维细胞的增 殖和胶原合成的影响。 目的：研究苯甲酸雌二醇对体外培养的人成纤维细胞增殖、胶原合成 及其对uvA抑制胶原合成的影响。方法：此实验由两部分组成。实 验一：用MTT法检测苯甲酸雌二醇对体外培养的成纤维细胞增殖情 况，并应用不同剂量苯甲酸雌二醇