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禽流感病毒H5亚型血凝素单克隆抗体的制备及捕获ELISA方法的建立
中文摘要
禽流感(AI)是由A型流感病毒引起禽类(家禽和野禽)的感染或疾病综合征。世界上许
多国家和地区都曾爆发过此病,给养禽业造成巨大的损失。同时,其对人类的公共卫生也造成
了相当大的威胁。因此,研究AI意义重人。
本研究将禽流感病毒(AIV)H5亚型分离株A/Chicken/GuangdongSZ,I/00(H5NI)(SZ),
接种9~11日龄SPF鸡胚,收集死亡鸡胚,经适当处理后免疫6~8周龄BALB/c小鼠。麻用淋巴
H5
细胞杂交瘤技术,经细胞融合后通过血凝抑制试验(HI)进行筛选,得到2株稳定分泌抗AIV
亚型血凝素蚩白的杂交瘤细胞株,分别命名为1E5,4A4。经鉴定,其免疫球蛋白亚型均为IgGl、
示,该单抗是针对AIVH5亚型血凝素蛋白的特异性McAb。
利用获得的抗AIVH5弧犁血凝素McAb,通过生物素——亲和素放大系统建立了单抗——
生物素捕获ELISA检测方法。结果表明,该方法特异性强,能够检出H5N3标准毒株和所有20
AIV
快速检测H5砸型的AIV具有良好的应用前最。
关键词:禽流感病毒,H5距犁,单克隆抗体,捕获ELISA
Abstract
Avianinfluenzaisaninfectionanddisease of and
syndrome
birds(poultrywildfowl)caused
by
influenzaAvirus.Thebroke
diseaseoutin countriesofthe
type many world,andresultedinaserious
the
economicloss-Atsame threatensthe
time,it hasa
health.Thus,it
public greatpracticalimportance
to thedisease.
study
H5 avianinfluenzavirus
subtype Was
A/Chicken/GuangdongSZ/I/00(H5NI)(sz)strain
intheallantoticof9~II SPFchicken
propagated cavity day-oldembryonated allantoticfluid
eggs.The
infectedwas
SZ inoculatedto6-8week-old
purified,and BALB/C the
mice.Byusinghybridoma
and cellsoftheimmunizedBALB/Cmice in
technique,SP2/0myelomacellsspleen
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