植物细胞染色体标本制备实验方法改进.pdfVIP

第24卷第 1期 宁德师范学院学报(自然科学版) Vo1．24No．1 2012年 2月 JournalofNingdeNormalUniversity(NaturalScience) Feb．2012 植物细胞染色体标本制备实验方法改进 郭团玉 (宁德师范学院 生物系，福建 宁德 352100) 摘要：结合多年生物实验教学实践，对植物的细胞染色体标本制备的实验取材、操作步骤、药品试剂等实验 方法进行改进，增进学生对实验原理的理解、简化实验过程 、节约实验经费，提高实验效果． 关键词：植物细胞 ；染色体；标本；实验方法；优化 中图分类号 ：G642．423 文献标识码：A 文章编号：2095．2481(2012)01—0062-03 植物细胞有丝分裂染色体标本的制备与观察实验，属于验证性实验类型．该实验对学生学习和理解 植物的生长、发育、遗传等起奠基性作用．中学生物课程开设 观《察根尖分生组织细胞的有丝分裂》实验l【1， 大学生物专业的植物学、遗传学、细胞生物学课程也都开设有 “植物细胞染色体标本制备与观察”实验嘲． 但是，不同学习阶段、不同课程 ，其实验的目的要求有不同侧重，而实验方法中实验步骤、取材、选用试 剂、操作方法等各教材根据实验需要而有所差异，实验效果也不相同．笔者在查阅相关资料和长期实验教 学实践的基础上，通过对比实验，对该实验方法进行了改进． 1 实验方法 (1)取材．水仙鳞茎 (3n=30)剔除包土、褐色老皮、老根，整个鳞茎用清水浸泡 ld后，改用水仙鳞茎 基部浸水，16—18℃水培发根 ，隔天换水至根长2—2．5cm． (2)预处理．取材当天上午 8：00—10：00，剪取 0．5一lcm根尖部分，室温下 ，用饱和樟脑丸溶液浸泡 4—6h． (3)固定保存．取出预处理根尖，投人 Camoy液(无水乙醇：醋酸=3：1)固定 8—12h；用 70％酒精浸洗 2次，并隔天换洗2次，而后密封存放长期使用． (4)解离．取预处理过的根尖放人解离液(95％乙醇和浓盐酸等量混合)中解离，使根尖变软，至夹取 易断状态为宜，解离约7-8rain． (5)第一次压片．取解离后的根尖用清水冲洗 lOs后 ，置于载玻片中间，用刀片切去根冠及伸长区部 分，只留 1-2ram分生区，另取载玻片与其交叉成 “十”字型扣压，将材料压成薄层，而后小心分开两载玻 片．如此，两载玻片中间区域皆附有一薄层材料． (6)染色．用石炭酸品红染色液，染色 3rain． (7)第二次压片．盖上盖玻片再履吸水 纸，用拇指轻压，亦可用铅笔的橡皮头在盖 玻片上轻敲数下，使根尖细胞扩散呈云雾状． (8)镜检观察．用 OLYMPUS生物显微镜 镜检观察、摄照(×400)，细胞分裂各期染色 体成像，见图 1(水仙根尖各分裂相细胞染色 体)． 图1水仙根尖各分裂相细胞染色体图 注：图a．前期；图b．中期；图c．后期；图d．末期 收稿 日期：2011-12—12 通讯作者：郭团玉(1968一)，女，高级实验师．E-mail：szmxp2003@163．corn 基金项 目：宁德师范学院校级教改资助项 目(2011lO9)． 第 1期 郭团玉：植物细胞染色体标本制备实验方法改进 ·63 · 2 结果与讨论 2．1 实验材料的选择是关键 实验材料选择关系到实验成功与否，决定着实验效果的明显程度．洋葱(2n=16)、蚕豆(2n=12)、水 仙鳞茎(3n=30)是观察植物细胞有丝分裂较好的材料13t41．笔者通过实验教学实践，并通过反复对比研究 表明，大麦、黑麦和小麦芽也可用做观察植物细胞有丝分裂的材料阿，有丝分裂各时期染色体、形状和结 构变化可见，但细胞染色体数 目多且细小，难以明晰观察，因此难以计数．水仙鳞茎具有水培发根快，生根 数量多且整齐 ，并且细胞染色体粗大，容易