白藜芦醇二聚体与眼镜蛇神经毒素的作用机制.pdf

华 南 理 工 大 学 学 报 （自然科 学版 ） 第４２卷 第２期 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．４２　Ｎｏ．２ ２０１４年２月 （ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｆｅｂｒｕａｒｙ　２０１４ 文章编号：１０００５６５Ｘ（２０１４）０２００２１０６ 　 白藜芦醇二聚体与眼镜蛇神经毒素的作用机制 叶勇　邢海婷　郭亚 （华南理工大学 化学与化工学院，广东 广州５１０６４０） 摘　要：通过ＤｉｓｃｏｖｅｒｙＳｔｕｄｉｏ软件模拟白藜芦醇不同结构二聚体与眼镜蛇神经毒素（ＮＴ） 的相互作用，采用波长３６５ｎｍ的光诱导白藜芦醇二聚体的形成，通过紫外－可见光谱分析 和荧光光谱分析得到不同白藜芦醇浓度和不同光照时间下ＮＴ的紫外－可见光谱和荧光光 谱，并对结合能及作用参数进行了运算．结果表明：相比于单体，白藜芦醇二聚物对ＮＴ的结 合能更大、作用更强；波长３６５ｎｍ的光照射白藜芦醇后，ＮＴ光谱发生了变化，紫外光吸收增 １２ 强，吸收峰红移，荧光猝灭，有新发射峰生成；荧光猝灭速率常数为５．６２×１０ Ｌ／（ｍｏｌ·ｓ）， ５ 猝灭机制属于静态猝灭；白藜芦醇二聚物和ＮＴ的结合常数为５．１２×１０Ｌ／ｍｏｌ，结合位点数 为１，结合距离为３．４０ｎｍ，易发生非辐射能量转移；同步荧光光谱显示白藜芦醇二聚体可与 ＮＴ的酪氨酸和色氨酸残基作用，羟基氢键导致其亲水性提高；白藜芦醇二聚体与ＮＴ的主 要作用位点在色氨酸残基． 关键词：白藜芦醇二聚体；眼镜蛇神经毒素；相互作用；结合能；紫外－可见光谱；荧光光谱 中图分类号：Ｒ９６６；ＴＱ２４１２ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００５６５Ｘ．２０１４．０２．００４ 　　白藜芦醇是存在于许多植物（如虎杖、葡萄）中 以期为实现两者的联合用药、提升临床镇痛效果提 的一种二苯乙烯化合物，具有抗肿瘤、抗艾滋病、抗 供技术和理论支撑． ［１３］ 炎镇痛及雌激素样作用等多种药理活性 ．它对光 ［４］ １　实验 敏感，紫外光可诱发其聚合 ．笔者所在课题组的 前期研究也证实，波长３６５ｎｍ的入射光照射导致了 １．１　主要试剂和仪器 ［５］ 白藜芦醇二聚体的形成 ．白藜芦醇二聚体在抗 白藜芦醇（纯度 ９９％，批，购自 ≥ 菌、抗病毒、抗氧化和抗肿瘤等方面的效果均优于白 广州菲博生物科技有限公司；眼镜蛇神经毒素，由笔 ［６７］ 藜芦醇单体，因而成为人们关注的焦点 ．眼镜蛇 者所在实验室从眼镜王蛇（Ｎａｊａｏｐｈｉｏｐｈａｇｕｓｈａｎ 神经毒素（ＮＴ）是从眼镜蛇毒中分离出的一种多肽， ｎａｈ）毒中分离获得；其他试剂均为分析纯试剂． ［８］ 具有中枢镇痛作用 ；但由于ＮＴ相对分子质量较 Ｆ