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长白山白眉蝮蛇血凝酶的分离纯化研究 １ ２　 　 （１． 　 １６１００５；２． 贾首时 王萌萌 齐齐哈尔市食品药品检验检测中心 黑龙江齐齐哈尔 齐齐哈尔市第一医院中西医结合 科） 　 　 ： 。 ： 、 、  摘 要 目的 建立一种分离纯化长白山白眉蝮蛇血凝酶的方法 方法 先后采用分子筛层析法 离子交换色谱法 肝素 Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ， ＳＤＳＰａｇｅ 、ＲＰＨＰＬＣ 亲和层析法从长白山白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一种具有有凝血活性的酶成分 并采用 法 ， （ＳＤＳＰａｇｅ） 、 （ＨＰＳＥＣ） 法测定其纯度 凝胶电泳法 考察其对牛纤维蛋白原的作用方式 高效空间排阻色谱法 测定其相对分子质 ， （ＩＥＦ） ，Ｌｏｗｒｙ 。 ： 量 等电聚焦电泳分析法 测定其等电点 法测定其蛋白浓度 结果 从长白山白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化了一种凝 ，ＳＤＳＰａｇｅ ，ＨＰＬＣ ， ， ３２．２ｋＤ， 血酶成分 显示为一条带 得到单一的色谱峰 该酶只作用于纤维蛋白原的α链 其相对分子质量为 ５．２１， 。 ： 。 等电点为 此酶具有体外凝血活性 结论 该方法可用于长白山白眉蝮蛇血凝酶的分离纯化 　 ； ； 关键词 长白山白眉蝮蛇 血凝酶 分离纯化 中图分类号：Ｒ２８４．１　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８０４９Ｘ（２０１７）０２０２１２０４ ＳｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＨａｅｍｏｃｏａｇｕｌａｓｅｆｒｏｍＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎＢｌｏｍｈｏｆｆｉｉｉｎＣｈａｎｇｂａｉＭｏｕｎｔａｉｎ １ ２ ＪｉａＳｈｏｕｓｈｉ，ＷａｎｇＭｅｎｇｍｅｎｇ（１．ＱｉｑｉｈａｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＱｉｑｉｈａｅｒ１６１００５，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎｏ．１ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＱｉｑｉｈａｅｒ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｈａｅｍｏｃｏａｇｕｌａｓｅｆｒｏｍａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｂｌｏｍｈｏｆｆｉｉｉｎ ＣｈａｎｇｂａｉＭｏｕｎｔａｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｎｅｎｚｙｍｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｗｉｔｈｃｌｏｔｔｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｖｅｎｉｎｏｆａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｂｌｏｍｈｏｆｆｉｉｉｎ ＣｈａｎｇｂａｉＭｏｕｎｔａｉｎｂｙｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ，ａｎｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｈｅｐａｒｉｎＳｅｐｈａｒｏｓｅａｆｆｉｎｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．ＳＤＳＰａｇｅａｎｄ ＲＰＨＰＬＣｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｉｔｓｐｕｒｉｔｙ，ＳＤＳＰａｇｅｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｓｔｕｄｙｉｔｓａｃｔｉｏｎｍｏｄｅｗｉｔｈｂｏｖｉｎｅｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，ＨＰＳＥＣｗａｓｕｓｅｄｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔ，ａｎＩＥＦｍｅｔｈｏｄｗａｓｅｍｐｌ