乳腺生物反应器表达产物层析分离过程中介质的污染机理及其再生策略.pdf

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2011, November 25; 27(11): 1645−1654 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn ©2011 CJB, All rights reserved. 生物技术与方法 1,2 2 2 2 1 2 孙西艳 ，张焱 ，李岩 ，罗坚 ，秦培勇 ，苏志国 1 北京化工大学生命科学与技术学院，北京 100029 2 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室，北京 100190 摘 要: 考察了磺酸基离子交换层析介质 (SP Sepharose FF) 在分离表达人乳铁蛋白的重组牛乳过程中的污染机理及 其再生策略。通过层析原料及流分中各组分含量的检测分析，发现牛乳中的脂类通过堵塞效应或疏水相互作用残留在 层析柱上，造成层析运行压力升高；部分酪蛋白通过静电相互作用占据介质的配基位点，导致介质的交换容量降低； 乳糖与介质之间无直接相互作用。连续层析运行次数的增加以及层析-再生时间间隔的延长，均能导致残留组分和介质 之间的相互作用逐渐增强，最终影响介质的再生效率。使用 NaOH 进行及时清洗，可以有效地清除柱上残留的脂类和 蛋白，恢复离子交换介质的层析性能和微观形态。 关键词: 乳腺生物反应器，重组牛乳，离子交换介质，污染机理，再生策略 Contamination mechanism and regeneration strategies of chromatographic resin in separation process for expression product from mammary gland bioreactor 1,2 2 2 2 1 2 Xiyan Sun , Yan Zhang , Yan Li , Jian Luo , Peiyong Qin , and Zhiguo Su 1 College of Life Science and Technology, Beijing University of Chemical Technology, Beijing 100029, China 2 National Key Laboratory of Biochemical Engineering, Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100190, China Abstract: This study focused on the contamination mechanism and regeneration strategies of sulfopropyl ion exchange resin (SP Sepharose FF) during the separation of recombinant human lactoferrin from transgenic bovine milk. We analyzed primary constituents’ contents in chromatorgraphic material and fractions. The results showed that the lipid in milk can clog the column or adhere to the resin through hydrophobic interaction, leading to an increase in column pres