血液、尿液中238种毒.doc

目 次 前言 I 1 范围 1 2 规范性引用文件 ......1 3 术语和定义 1 4 原理 .1 5 试剂和仪器 1 6 测定步骤 2 7 结果评价 5 8 方法检出限 附录A 6 前 言 本技术规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。 本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口。 本技术规范起草单位：司法部司法鉴定科学技术研究所。 本规范主要起草人：本规范  血液、尿液中238种毒(药)物的检测液相色谱-串联质谱法 1 范围 本技术规范规定了血液或尿液中阿片类、苯丙胺类、大麻酚类滥用药物，有机磷及氨基甲酸酯类杀虫剂、苯二氮卓类、抗抑郁类、抗癫痫类、平喘类、解热镇痛类药物以及其它常见治疗药物共238种毒（药）物（见附录A）的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检验方法。 本技术规范适用于血液或尿液中阿片类、苯丙胺类、大麻酚类滥用药物，有机磷类及氨基甲酸酯类杀虫剂、苯二氮卓类、抗抑郁类、抗癫痫类、平喘类、解热镇痛类药物以及其它常见治疗药物共238种毒（药）物的定性定量分析规范性引用文件 下列文件中本技术规范的用。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本技术规范。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本技术规范。 GA/T122毒物分析名词术语GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 GA/T122中界定的术语和定义适用于本技术规范。 4 原理 本技术规范利用阿片类、苯丙胺类、大麻酚类滥用药物，有机磷及氨基甲酸酯类杀虫剂、苯二氮卓类、抗抑郁类、抗癫痫类、平喘类、解热镇痛类以及其他常见治疗药物共238种毒（药）物可在碱性条件下被有机溶剂从生物检材中提取出来的特点，利用LC-MS/MS多反应监测进行检测。经与平行操作的毒（药）物对照品比较，以保留时间、两对母离子/子离子对进行定性分析；以定量离子对峰面积为依据，内标法或外标法定量。 5 试剂和Ω·cm。 5.1.6 pH9.2硼砂缓冲液。 5.1.7 20mmol/L乙酸胺和0.1%甲酸缓冲液：分别称取1.54g乙酸铵和1.84g甲酸，置于1000mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀备用，pH 值约为4。 5.1.8 238种毒(药)物对照品标准溶液：分别精密称取238种毒(药)物对照品各适量，用甲醇配成1.0mg/mL 对照品标准储备溶液，置冰箱中冷冻保存，保存时间为12个月。试验中所用其它浓度的对照品标准溶液均从上述储备液用甲醇稀释而得。 5.1.9内标物和SKF525A 对照品标准溶液：精密称取和SKF525A 适量，用甲醇配制成1.0mg/mL 和SKF525A 对照品混合标准储备溶液，置冰箱中冷冻保存，保存时间为12个月。将储备液用甲醇稀释得1μg/mL和SKF525A内标工作液，置冰箱中冷藏保存，保存时间为6 个月。 注：本技术规范所用试剂除另有说明外均为色谱纯，试验用水为一级水（见GB/T 6682规定）。 取血液或尿液1mL，加入10(L和SKF525A 内标溶液（1μg/mL），加入2mL pH9.2硼酸缓冲液后用3.5mL乙醚提取，混旋，离心。上清液于60(C水浴中挥干，残余物中加入200(L流动相复溶，取10(L进LC-MS/MS分析。 如果待测样品出现两对母离子/子离子对的特征色谱峰，保留时间与添加样品中相应对照品的色谱峰保留时间比较，相对误差在±2%内，且所选择的离子对相对丰度比与添加对照品的离子对相对丰度比之相对误差不超过表1规定的范围，则可认为中检出此种成分。 表 相对离子对丰度比的最大允许相对差(%) 相对离子对丰度比 ≥50 20(50 10(20 (10 允许的相对差 (20 (25 (30 (50 根据待测样品中的浓度情况，用空白添加相应对照品，采用内标法或外标法，以定量离子对峰面积进行定量测定。定量方法可采用工作曲线法或单点校正法。 采用工作曲线法时待测样品中的浓度应在工作曲线的线性范围内。配制系列浓度的质控样品，按“6.1”进行样品处理，按“6.2.1”条件进行测定，以和内标定量离子对峰面积比或定量离子对峰面积为纵坐标，中浓度为横坐标绘制工作曲线，用工作曲线对待测样品中浓度进行定量。 采用单点校正法时待测样品中的浓度应在添加样品中浓度的(50%内。 结果计算 -工作曲线法 在系列浓度的毒（药）物血液或尿液质控样品中，以毒（药）物与内标定量离子对的峰面积比（Y）为纵坐标、毒（药）物质量浓度（C）为横坐标进行线性回归，得线性方程。 根据待测样品中毒（药）物与内标定量离子对峰面积比（ ………………………………（1） 式中： C((待测样品中浓度，单位为克