粘虫中肠!-淀粉酶活性测定方法的参数优化 - 昆虫学报.pdf

昆虫 学 报 ， ， （ ）： !#$ %#’(’)’*+$ ,++$ !#$%’ ())* +) ,) -., / -.. 0112 )3+345(-5 粘虫中肠 淀粉酶活性测定方法的参数优化 ! ! ! 孔玉萍，黄青春 ，刘曼慧，丰 俊，刘 扬 （华东理工大学药学院，上海市化学生物学重点实验室，上海 ())(6* ） 摘要：针对粘虫 中肠 淀粉酶筛选了 种不同参数组合的 ，二硝基水杨酸活性测定方法，并 -.#/+($ 012 $3$#$ 4 ,, 6 +4 ! 对其中最适组合的各个参数进行了优化。结果表明：在离体测定条件下，粘虫中肠 淀粉酶活性的最优化测定参 4 ! ( S 数为 磷酸盐缓冲液（ ，含有 ）、温度 、吸收波长 。 对 淀粉酶活性具 ) N)6 :$=O P @Q . N) ++ ::$=O P 2;7= 3+R 3.) H: 7; 4 ! 有抑制作用。该优化法能够显著降低粘虫、德国小蠊 4)$##1))$ *13($+$ 、黄粉虫 51163+’ (’)+#’3 、淡色库蚊 78)19 和家蝇 等昆虫 淀粉酶的米氏常数 值，且粘虫和德国小蠊 淀粉酶的 值增大， 2 +2 +10 2 $))10 -80$ :’(10#+$ 4 ; 4 ! ! : :;T 但黄粉虫、淡色库蚊和家蝇 淀粉酶的 值均明显减小。结果说明，在该优化体系下，粘虫 淀粉酶与底物的亲 4 4 ! ! :;T 和力增强，最大反应速度增大，测定酶活性的准确性和灵敏度显著提高；同时该优化体系也可作为测定德国小蠊 4