人氧化低密度脂蛋白(ox-ldl)酶联免疫分析（elisa） 试剂盒使用说明书.pdf

人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关 液体样本中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。用纯化的人 氧化低密度脂蛋白(ox-LDL) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加 入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)，再与 HRP 标记的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体结合，形 成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化 下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的氧化低密度脂蛋 白(ox-LDL)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算 样品中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 96 孔配置 保存 说明书 1 份 封板膜 2 片（96 ） 密封袋 1 个 酶标包被板 1 ×96 2-8℃保存 标准品：270μg/L 0.5ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 标准品稀释液 1.5ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 酶标试剂 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 样品稀释液 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 显色剂 A 液 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 显色剂 B 液 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 终止液 6ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 浓缩洗涤液 （20ml ×30 倍）×1 瓶 2-8 ℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 1 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS （PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分 钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS ，PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS （PH7.4 ），用手工或匀浆器