一氧化氮在肌红蛋白修饰电极上的电催化还原.pdf

化学学报 ACfA CHIMICA SINICA 1997, 55 , 486-490 一氧化氮在肌红蛋白修饰电极上的电催化还原 张海丽祷赘 陈洪渊* 俞爱民 (南京大学化学系，配位化学国家重点实验室 南京 210093) 摘要 本文研究了醋酸盐缓冲体系中 NC石歧化产物 NO 在肌红蛋白修饰玻碳电极上的电催化还 原反应，其还原峰电位为一O. 68V( vs. SCE). 文中考察了溶液酸度、亚硝酸根离子浓度等对修饰电 极的电化学行为的影响，并对一氧化氮在肌红蛋白修饰电极上的电催化还原机理进行了探讨. 关键词 一氧化氮，肌红蛋白，化学修饰电极，电催化 一氧化氮是一种重要的生物调节分子，它具有使血管扩张的能力和增强神经元连接的作 用.它的扩散不仅对记忆的形成起一定作用，而且对大脑在胚胎发育期中的空间组织起促进作 用[1.2J 研究一氧化氮在生物分子中的电荷传递过程对搞清大脑记忆的建立和保存，高血压、 糖尿病、动脉血管粥样硬化等疾病的防治有着积极意义;同时也有助于从分子水平上阐明生物 体系的物质代谢和能量传递过程.据文献报道，铁卧琳可以与酸性溶液中的 NC右的歧化产物 3 5J Nä - NO 电化学还原的催化剂[5-7J. Malinski[81 等报道了用以 Ni 为中 形成配合物，并作为 心离子的叶琳基修饰碳纤维微传感器现场测量单细胞中释放出的 NO. Miki[91 等研究了水榕 液中的细胞色素 C 对 NO还原反应的电催化作用.肌红蛋白(Mb)是含有一个血红素基团的氧 化还原蛋白质，我们将其作为修饰剂直接修饰到玻碳电极上，然后对NO 在修饰电极上的电催 化还原反应进行了研究.结果表明，该修饰电极具有制作简便、响应时间短、催化效果好等优 点.由于该电极采用生物蛋白质分子作为修饰剂，易于微型化，可望制成新型生物微传感器用 于生物活体分析，因而有着诱人的应用前景. 1 实验 1. 1 仪器和试剂 BAS100B 电化学分析仪(BAS 公司，美国)，岛津 uv- 240 紫外分光光度计(日本) , M174A 电化学分析仪(EGG，美国) ,Perkin - Elmer LS - 50B 荧光光谱仪(美国).马心肌红 蛋白(99% ，为高铁肌红蛋白，Sigma 公司，美国)，其他试剂均为国产分析纯，所有溶液均用二 次石英重蒸水配制. 1.2 修饰电极的制备 玻碳电极(φ=3mm) 经抛光、超声清洗后放入pH 5.5 的 HOAc-NaOAc 缓冲溶液中，先 于1. 2V( vs. SCE) 电位下放置 10min，再于 0~ 1. 2V 电位区间内，以 v=50mV/s 扫描lOmin 1995-07-25 收到.修改稿 1996 - 07 一 05 收到.国家自然科学基金重大项目资助课题.警惕湖北师范学院化学系访 问学者. 化学学报 ACTA CHIMICA SINlCA 1997 487 作电化学预处理.取出电极不经清洗直接放入O.lmmollL肌红蛋白溶液中(pH 5.5) ，在一 0.3 ~一0.8V 电位区间内作循环扫描lOmin. 取出电极用二次水淋洗后待用. 1.3 实验方法 电化学实验采用三电极系统:修饰电极为工作电极，以二E 为参比电极，铀丝为对电极.测 量前溶液通Ar除氧，实验过程中溶液上方保持氧气氛. 2 结果与讨论 2.1 Mb-NO 配合物的吸收光谱 考察了 HOAc - NaOAc (pH 4.0)缓冲体系中 NaNÜz存在时的肌红蛋白(Mb)吸收光谱， 并与无 NC石存在通纯净 NO气体至饱和时的Mb吸收光谱进行了比较(见图 1) ，结果完全一 致;另外，对照Mb的吸收光谱发现在 570 ,530 ,410nm 处有新的吸收峰生成.这表明在酸性榕 液中 NÜz-能发生歧化反应生成 NO 和 NÜ:3- ，而 NO 与Mb反应又生成了一种新的配合物，新 峰位置与文献报道的铁叶琳基-NO 配合物的峰值基本一致