固相萃取法提取中药活性成分非瑟酮 - 生物分子高效分离与表征研究组.pdf

维普资讯 V01．27 高等 学校 化 学 学报 No．4 2006年4月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 6o8—611 应用分子印迹-固相萃取法提取 中药活性成分非瑟酮 李 礼 ，胡树国 ，何锡文 ，李文友 ，陈朗星 ，张玉奎 ’ (1．南开大学化学学院，天津300071；2．中国科学院大连化学物理研究所 ，大连 116011) 摘要 分别以中药黄栌的主要成分非瑟酮为印迹分子、丙烯酰胺为功能单体及乙二醇二甲基丙烯酸酯为交 联剂，通过封管聚合法合成了分子印迹聚合物；将其装于自制的固相萃取柱中，研究了以不同体积比的乙 醇．水溶液为溶剂时非瑟酮在柱上的保留行为；通过优化清洗及洗脱条件 ，使非瑟酮与它的结构相似物槲皮 素在柱上得到了很好的分离． 关键词 非瑟酮；槲皮素；分子印迹聚合物(MIPs)；固相萃取；中药 中图分类号 0657．3 文献标识码 A 文章编号 0251-0790(2006)04-0608-04 分子印迹技术是近年来发展起来的一门新技术，它的应用领域很广，可应用于环境、食品及药物 等领域口“]．分子印迹聚合物因对 目标物有较高的选择性而可进行手性分离，又因具有一定的机械强 度和耐酸、碱及热的稳定性而将其视为性能优 良的吸附剂．固相萃取出现于2O世纪7O年代中期，因 其将分离与富集融为一体，具有操作简易、负载量大及回收率高等优点，而受到普遍关注 ．其不 足之处在于，常用的吸附剂缺乏分离专一性，仅用固相萃取，对复杂样品难以达到预期 目的，而分子 印迹聚合物刚好弥补了该缺陷，它不仅能分离具有相似结构的混合物，而且还可纯制 目标物．以分子 印迹聚合物作为固相萃取的吸附剂，即分子印迹-固相萃取法有着广泛的应用前景¨n． 黄栌 (漆树科植物，Cotinuscoggygriascop)是治疗急性黄疸 肝炎的中药，非瑟酮(Fisetin，又名漆 黄素)是其主要的有效成分 ¨，它具有多种生理活性 ¨，目前对它的研究还比较少L2UJ． 本文将非瑟酮分子印迹聚合物作为固相萃取吸附剂，经实验得到了比较理想的上样、清洗及洗脱 液体系．根据实验条件优化的结果，建立了分子印迹-固相萃取的分离富集方法，用该方法可以成功地 分离非瑟酮及其相似物槲皮素(Quercetin)． 1 实验部分 1．1 试剂与仪器 非瑟酮 (化学对照品，中国药品生物制品检定所)，槲皮素 (纯度≥99％，上海同田生化技术有限 公司)，两者的结构式见 Scheme1．乙二醇二 甲基丙烯酸酯 (EDMA，江苏安利化工有限公司，分析 纯)，丙烯酰胺 (天津化学试剂研究所，分 OH O 析纯)，偶氮二异丁腈 (AIBN，南开大学分 校特种试剂实验厂，化学纯)，氢氧化钠 … (天津试剂公司，分析纯)，无水乙醇、丙 酮和Ⅳ，Ⅳ一二甲基甲酰胺(一DMF)均为分析 纯，实验用水为双蒸去离子水． Scheme1 Chemicalstructureofanalogues 收稿 日期：2005-064)2． 基金项 目：国家自然科学基金(批准号20375019和天津市自然科学基金(批准号：033603511)资助． 联系人简介：何锡义(1939年出牛)，男，教授，博士牛导师，从事分子印迹和分子识别研究．Em·ail：xiwenhe@nankai．edu．cn； 张玉辛(1942年出E)，男，研究员，博士生导师，中围科学院院士，从事色谱基础理论及新技术开发应用研究． E—mail：Ykzhang@ online．in．cn 维普资讯 李 礼等：应用分子印迹．固相萃取法提取中药活性成分非瑟酮