酶工程课程教学大纲.docVIP

《酶学》课程教学大纲 课程名称： 酶学 课程类型: 必修课 总 学 时： 讲课学时： 学分：适用对象: 先修课程：二、教学基本要求三、教学内容及要求 1、绪论 酶的基本概念与发展历史； 酶的基础内容：酶催化作用特点,酶的分类与命名等；酶活定义问题，酶的活力测定方法； 酶蛋白的分离纯化方法（层析、电泳等的应用及蛋白酶纯化过程）； 对酶及酶学发展的再认识：生物催化剂概念的认识；生物催化分子的进化与生命起源；催化研究在生物技术中的体现：结构、机制与调节。 了解酶的基本概念与发展历史，生物催化分子的进化与生命起源及生物催化剂概念的认识；熟悉酶催化作用特点,酶的分类与命名等酶的基础内容，掌握酶蛋白的分离纯化方法（层析、电泳等的应用及蛋白酶纯化过程） 2、酶的结构与功能 酶的化学本质与化学组成：蛋白酶的氨基酸类别及组成；核酸类酶的组成； 酶的化学结构（一维结构）与酶的空间结构（多维结构）的关系； 酶的活性中心特征与鉴定:概念，活性中心一级结构与立体结构； 酶的结构与催化功能的关系：一、二、三、四级结构与催化功能关系；辅因子与催化功能关系； 酶的分子修饰方法学及影响：氨基酸或核苷酸置换修饰；大分子修饰；侧链分子典型基团修饰；物理修饰；分子修饰过程描述及影响结果 了解酶的化学本质与化学组成，酶的化学结构（一维结构）与酶的空间结构（多维结构）的关系；熟悉酶的空间结构特征，酶的活性中心特征与鉴定；掌握认识一、二、三、四级结构与催化功能关系；辅因子与催化功能关系；掌握酶的分子修饰方法学及对酶活性质等的影响 3、酶的催化反应机制 酶催化中作贡献的主要因素； 酶催化机制主要内容：趋向与定向效应,构象变化效应；酸碱催化效应（催化形式与催化基团）；共价催化机制（亲核催化与亲电催化）；微环境对酶催化的效应（微环境的形成原理及对酶催化过程的影响）； 核酸类酶的催化机制：RNA的自我剪接机制,RNA的自我剪切机制； 酶作用机制的研究方法与实验手段：动力学研究；X射线晶体方法学；中间产物检测手段；氨基酸侧链修饰方法的应用等 了解酶催化中作贡献的主要因素，熟悉核酸类酶的催化机制（RNA的自我剪接机制,RNA的自我剪切机制）；酶作用机制的研究方法与实验手段；掌握酶催化机制主要内容，包括趋向与定向效应,构象变化效应；酸碱催化效应（催化形式与催化基团）；共价催化机制（亲核催化与亲电催化）；微环境对酶催化的效应（微环境的形成原理及对酶催化过程的影响） 4、酶催化反应动力学 单底物反应动力学：快速平衡假设与稳态法对速度方程的推导；米氏方程的讨论；酶促反应分析中的作图法（L-B法及其它线性作图法）；米氏方程的积分及意义；酶促反应稳态前动力学（快反应技术、停流法、弛豫法的应用）等； 抑制作用动力学： 1,不可逆抑制作用：非专一性的不可逆抑制作用（类型、抑制剂代表及在酶分子必需基团性质与数目判断中的应用）；专一性的不可逆抑制作用（Ks型与Kcat型的区别与作用特征）； 2、可逆抑制动力学：K-A法基本推导过程； 可逆抑制作用内容：①类型、抑制过程及特征（竞争性抑制作用；非竞争性抑制作用；反竞争性抑制作用；线性混合性抑制作用；底物抑制作用）②抑制动力学推导（快速平衡与稳态法）③抑制参数Ki求解的作图法（二次作图法、Dixon作图法等）； 多底物酶促反应动力学：表达方法与命名规则；双底物反应恒态动力学中King-Altman方法推导速度方程（注意封闭圈问题）；双底物酶促反应类型有①形成三元复合物的有序顺序反应（系统速度方程与动力学常数求解）；②形成三元复合物的随机顺序反应（系统速度方程与动力学常数求解）；③不形成三元复合物的乒乓反应机制（系统速度方程与动力学常数求解）；多底物酶促反应一般方程与动力学常数求解：①Alberty方程（双到数作图，分底物饱和与半饱和）； ②Dalziel方程表达式（二次作图法求解￠0,￠A,￠B￠AB）；多底物酶促反应机制的判断（抑制作用研究的应用等）。 别构酶反应动力学：配体与蛋白质结合的协同效应（Hill方程的推导，Hill系数）；别构酶的种类、重要特征、结构性质及动力学特性；别构效应的判断方法（作图法、协同指数法）；别构酶作用机制的解释：①MWC模型（齐变模型），内涵及酶活性中心被配体占据的饱和分数推导②KNF模型（渐变模型），与MWC模型的区别，酶活性中心被配体占据的饱和分数推导。 pH和温度对酶催化反应速度的影响：pH值对酶促反应影响的几个方面；pH值与酶活性部位基团的解离关系（双解离模型及模型方程推导）；温度对酶促反应的影响几个方面；Arrhenius方程对温度影响的表示，反应速度的温度效应表示Q10 ；活化能与温度系数的关系 了解单底物反应动力学；抑制作用分类；多底物酶促反应动力学的