抗人肿瘤血管内皮细胞标志物基因-1蛋白表达产物单、多克隆抗体的制备及其在部分肿瘤组织中的分布分析.pdfVIP

中文摘要 抗人肿瘤血管内皮细胞标志物基因一1蛋白表达产物 单、多克隆抗体的制备及其在部分肿瘤组织中的分布研究 中文摘要 目的 制备抗人TEMl基因蛋白表达产物的单、多克隆抗体，利用制备的抗体对 其在部分肿瘤组织中的表达和定位情况进行初步探讨，为以TEMl基因蛋白表 达产物为靶标的恶性肿瘤导向治疗的研究提供理论依据。 方法 原核系统表达人TEMl蛋白作为抗原，免疫6周龄雌性Balb／c小鼠，制备 单克隆抗体；免疫雄性新西兰兔，制各多克隆抗体；利用制备的单克隆抗体， 免疫组织化学方法(ABC法)检测TEMl蛋白在部分人体肿瘤组织中的分布 情况。 结果 1．经Western Blot鉴定，制备出特异性的抗人TEMl基因蛋白表达产物 的单克隆抗体。 2．制备出抗人TEMl基因蛋白表达产物的多克隆抗体。 3．免疫组织化学方法在下列组织中检测到TEMl的表达：骨肉瘤血管内 皮细胞；结肠癌血管内皮细胞、结肠腺癌细胞、肠壁平滑肌及血管平滑肌细胞； 乳腺癌细胞及血管平滑肌细胞；正常皮肤表皮层鳞状上皮细胞。 结论 1．成功地制备了特异性抗人TEMl基因蛋白表达产物的单克隆抗体及多 克隆抗体。 2．阐明了人TEMl基因蛋白表达产物在部分组织的分布并非特异的定位 于肿瘤血管内皮细胞。其在结肠癌、乳腺癌的腺上皮细胞和平滑肌细胞也有丰 富的表达，乃至一些正常组织如皮肤鳞状上皮细胞也可检测到TEMl基因蛋白 表达产物的存在。因此，本课题的研究中TEMl基因蛋白水平的分布与先前核 酸水平的分布不完全相符，虽然TEMl在蛋白水平不是一个肿瘤血管内皮细胞 特异性的标志物，但其只表达于恶性肿瘤血管而不表达于正常组织的血管，以 其为靶标的导向治疗仍有进一步研究探讨的价值。我们的结果还提示，在导向 治疗的研究中，直接寻找对其有意义的蛋白标志物是一种更可靠、有效的方法。 关键词 肿瘤血管内皮细胞标志物基因-l(TEMl)； 原核表达；单克隆抗体：多 克隆抗体；免疫组织化学 英文摘要 Markerl TumorEndothelial ofAnti—human Preparation and Monoclonal PolyclonalAntibody in Tissues Tumor ItsProteinDistribution and of Study Abstract TumorEndothelial anti-human Prepare Purpose and thedistributionof intumortissueswas polyclonalantibody，then TEMl一protein to withthismonoclonal order byimmunohistochemistry antibody,in investigated