基础课时案4胚胎工程及生物技术的.docVIP

基础课时案46　胚胎工程及生物技术的 伦理问题 1．(2014·山东济南3月模拟)下图为某转基因小鼠培育过程示意图，①～⑦表示相关过程。请回答： (1)过程①注射的A物质是________，目的是使供体母鼠________。 (2)过程③把目的基因和运载体连接需要在________的催化下完成，过程④常用的方法是________。 (3)过程⑤要通入的气体除氧气外，还要含有5%左右的________，其作用是__________________。 (4)蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是________。为获得较多基因组成相同的转基因小鼠，常采用________的方法。 解析　(1)对小鼠注射促性腺激素的目的是促进超数排卵，从而获得更多的受精卵。(2)基因表达载体的构建需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶，而将目的基因导入小鼠的受精卵一般采用显微注射法。(3)在培养受精卵时，培养液中要加入动物血清使受精卵正常分裂，通入CO2调节培养液的pH。(4)检测目的基因是否成功表达，常采用抗原—抗体杂交技术。要得到多个转基因小鼠可利用胚胎分割技术将早期胚胎进行分割，再进行胚胎移植，这样得到的小鼠基因型完全相同，因此也叫克隆。 答案　(1)促性腺激素　超数排卵　(2)DNA连接酶　显微注射法　(3)CO2　维持培养液的pH　(4)抗原—抗体杂交　胚胎分割移植(或克隆) 2．如图是克隆羊的培育流程图，根据所学知识回答下列问题。 (1)培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到________________。 (2)从供体羊中取上皮细胞，用________处理，然后进行分散培养。培养过程一般在________(填仪器)中进行，整个过程必须保证细胞处于________的环境中，所需营养物质要与体内基本相同。 (3)通过显微操作吸出卵母细胞中的细胞核，此过程中除了可以吸出细胞核，往往还可以将________一并吸出。 (4)去核的卵母细胞与供体细胞通过电刺激后融合，________进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎。融合后的重组细胞，需要用物理或化学的方法进行激活，使其完成减数分裂和发育进程。 (5)将重组胚胎发育到一定阶段，移植到同种的、________相同的其他雌性动物体内，使之继续发育，最后形成克隆羊。移入的胚胎能够存活，是因为受体并不会对其发生________，同时能够在子宫内建立正常的生理和组织联系。 答案　(1)减数第二次分裂中期　(2)胰蛋白酶　二氧化碳培养箱　无菌、无毒　(3)第一极体　(4)供体核　(5)生理状态　免疫排斥反应 3．(2014·江西师大等重点中学联考)下图为绿色荧光小鼠制备流程图， Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答： (1)构建表达载体需要的酶是________，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、________、________、终止子和复制原点等。 (2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对细胞有毒害作用)，添加G418的目的是____________________。 (3)图中所用的胚胎干细胞来自于______________。 (4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的__________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素进行__________________处理。 (5)可以使用________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。 解析　(1)基因工程中常用限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体，后用DNA连接酶连接目的基因和运载体。基因表达载体包括启动子、标记基因、目的基因、复制原点、终止子等。 (2)Neo基因是一种抗生素抗性基因，而G418是一种抗生素，该物质对细胞有毒害作用，所以培养液中添加G418可将导入目的基因的胚胎干细胞筛选出来。 (3)胚胎干细胞来自早期胚胎或原始性腺，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。 (4)囊胚时期的内细胞团将发育成幼体的各种组织和器官，所以应将含目的基因的胚胎干细胞注射入囊胚的内细胞团中。胚胎移植前要对供体和受体进行同期发情处理，以使供体和受体具有相同的生理状态。 (5)在分子水平鉴定目的基因是否表达产生相应蛋白质，可采用抗原－抗体杂交方法。 答案　(1)限制性核酸内切酶和DNA连接酶　标记基因 启动子　(2)筛选出导入目的基因的胚胎干细胞　(3)早期胚胎或原始性腺　(4)内细胞团　同期发情　(5)抗原—抗体杂交 4．如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题。 (1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是________技术，这两种动物繁殖的方式相比，实质性的区别为前者是________，后者是________。 (2)一