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栉孔扇贝大规模死亡致病病原分析
栉孔扇贝大规模死亡致病病原研究
摘要
摘要:对来自不同疫区的濒死的栉孔扇贝(Chlamysfarreri)消化腺、肾、
和肠进行超薄切片及电镜观察,在上述组织细胞质内发现大量的球形病毒粒
子并伴有明显的病理学变化。该病毒粒子具有囊膜,完整的病毒粒子直径为
包涵体存在。
体(Rickettsiaorganism,R0)毒种对健康扇贝进行人工感染。结果显示
病毒注射组病贝出现和疫区病贝相同症状,死亡率明显高于对照组。电镜复
检结果显示,发病扇贝的外套膜、鳃、消化腺组织中分布有大量病毒粒子,
该病毒粒子的形态特征、病理学特征与自然海区发病扇贝中的病毒粒子特征
完全一致。人工感染实验结果证明,栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒是栉孔
扇贝大规模死亡的致病病原。
经组织匀浆、差速离心和密度梯度离心,分离纯化出的病毒粒子与超薄
切片的病毒粒子形态一致、大小相近,且可观祭到病毒囊膜表面覆有囊膜纤
突。以蛋白酶k裂解法,异硫氰酸胍.酚.氯仿一步法,TRAZOL试剂法提取
该粒子的核酸分别进行TAE琼脂糖电泳和MOPS琼脂糖变性电泳,结果表
明该粒子的遗传物质为核糖核酸,是一神RNA瘸毒。
为了建立基于病毒核酸检测的扇贝大规模死亡监测技术,首先建立了
病毒核酸分子克隆实验体系,并对克隆菌株的检测技术进行了探讨。
关键词:栉孔扇贝,病毒,病理学,癌染试验,病原学
for
the
ResearchOHcausative abnormal
aetiology
of
mortalityscallopChlamysfarrert
Abstract
Abstract:nle and ofthe
changes Chlamys
pathologichistopathologic scallop
and
the ofthevirus wereobservedunderand
farreri morphology particles optic
electronic showedthattherewl∞fe virus.1ike
microscope.n硷results spherical
in
the theintestineofmoribund
particlesdigestive#and,kidney,and scallop
to
arc l70nrnin
virion 130 diameterandhas
Chlamysfarreri.Theapproximately
abilaminal thenuc|eo are90—140Brn.nlevirus00:cUIS
envelope.whilecapsids
anddistributesinthe vesiclesofinfectedcells.andforms
cytoplasmic occluding
infeetedwith virtlS distinct
tissue
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