水皂角活性多酚提取、纯化与检测技术的分析.pdfVIP

摘 要 植物多酚具有抗氧化、抗自由基、抗紫外线等活性，广泛应用于医药、食品、化 妆品等行业。水皂角又名山茶叶、山扁豆，民间应用历史悠久，主要用于清肝明目、 和脾利水，散瘀化积，治疗湿热黄疸、暑热吐泻、水肿、目花、夜盲、偏头痛、劳伤 积瘀、d,JL疳积、脚气等疾病。现代药理以及植物化学研究证明，水皂角多酚是新发 现的植物多酚类化合物，它除了具有其它植物多酚的共同特性之外，尤表现出强的脂 肪酶抑制作用，能有效防止和治疗肥胖，极具开发潜力。目前，水皂角多酚的研究主 要集中在药理方砸，而对其提取、分离纯化与检测方面的研究国内外尚未见报道，本 研究在这些方面作了初步探索，首次建立了一套经济、安全、适用于工业化生产的水 皂角多酚提取、分离与检测方法。 本研究采用紫外可见分光光度法建立了水皂角总多酚的测定方法，该法具有操作 简单，设备要求低，检测速度快，重现性好，灵敏度高，是目前适用于水皂角多酚工 业化生产要求的最可行的检测手段。通过对检测波长的选择、标准品的选择、预处理 方法、浓度与吸光度相关性的研究，确定了最佳检测波长为^=760hm，以表儿茶素 方程为A亍O．08949 总多酚含量，发现芽期的含量最高，其次是果期，考虑总多酚含量和生物产量，宜以 果期为最佳采集期。 在提取工艺研究中，采用乙醇水溶液为浸提剂，具有安全、无毒、无有害溶剂残 留等优点，符合健康食品以及医药品生产要求。以水皂角总多酚含量为考察指标，通 过单因素实验、正交实验以及方差分析，综合考虑提取效果与生产成本，对提取条件 ℃，浸提时间为5h，固液比为l：lO。 本研究采用大孔树脂对水皂角多酚进行富集分离，具有可操作性强、设备简单、 质量稳定、经济效益好等特点。根据大孔树脂的吸附机理，本研究从大孔树脂本身的 物理、化学特征和吸附介质性质入手，运用静态吸附与解吸实验对大孔树脂进行筛选。 然后，通过单因素实验、正交实验以及方差分析确定了水皂角多酚分离纯化的最佳操 作条件。静态吸附与解吸中，S-8大孔树脂表现出最好的吸附性能与良好的解吸效果， 度以及料液酸碱度明显影响吸附效果，而洗脱效果由乙醇浓度、洗脱速度、洗脱剂酸 碱度以及洗脱剂用量来决定。实验确定的最佳吸附条件为A382c3，即上柱速度为 大实验验证了该分离富集方法的有效性，结果证明s-8动态吸附量达70mg／ml湿树脂 以上，洗脱率可达98％以上，分离纯化后的产品水皂角总多酚含量达65％，较原材料 中水皂角多酚含量提高30倍以上。 对水皂角纯化产品进行了谱学测定。首次建立了水皂角提取物的HPLC和HPTLC 分离方法，初步建立了水皂角纯化产品的指纹图谱。首次将紫外吸收光谱、1H谱、¨c 谱和DEPT谱等波谱技术运用于水皂角纯化产品的定性分析，直接、快速检测到了水 皂角纯化产品中的有效组分。 【关键词】 水皂角，多酚，分离，纯化，检测，大孔树脂，脂肪酶抑制剂，HPLC HPTLC，NMR Abstract Plant are to andcosmetic polyphenolswidelyappliedpharmaceutical，foodindustries， a as since contain of variety activities，such they biological andSO on．Cassia shuizao cha radicals，anti—ultravioletnomame，called jiao，shanyei，shan biandou a is etc．in ofutilizationinfolk．Itusedworldwideforthe