新型激光诱导荧光检测器的研制及评价.pdfVIP

仪器评介 新型激光诱导荧光检测器的研制及评价 刘翻 孙元社 唐 涛 杨长龙 李英杰 李彤 张维冰 (1．齐齐哈尔大学 齐齐哈尔 161006) (2．大连依利特分析仪器有限公司 大连 116023) (3．华东理工大学 上海 200237) 摘 要 采用成本低、灵敏度高的反射式z一型检测池，成功研制新型473nm固体激光诱 导荧光检测器 (LIFD)。用荧光物质异硫氰酸荧光素 (FITC)标准品评价检测器性能，其灵 敏度高，最低检测浓度为 1×10。。mol／L(S／N=l5)，线性范围超过 4个数量级。进一步使用 FITC衍生化苯胺、对 甲苯胺 、对氯苯胺、联苯胺 、对苯二胺等5种物质 ，评价该检测器， 最小检测量达到 Pg级，重现性好 ，5种物质保 留时间RSD值均小于 1％(n=7)。说明该检 测器具有灵敏度高、稳定性好、线性范围宽等特点，适用于环境与生物领域痕量物质检测。 关键词 反射式z一型检测池 激光诱导荧光检测器 高效液相色谱 引 言 导体二极管激光器为光源，采用模块化共聚焦光路 设计。与常规采用气体激光器相比，其使用的半导 荧光检测技术因其具有灵敏度高、荧光性质专 体二极管激光器具有稳定性好、价格低和寿命长 一 及信息量大等特点，在高效液相色谱系统中得到 等优点 ；同时它是一种蓝光激光器，发射波长为 广泛应用 。不同于常规荧光检测器，激光诱导荧光 473nm，较现在多使用的红光、红外激光器，拥有 检测器以激光为光源，采用独特的光路设计，有效 更多荧光试剂与其匹配，因而应用范围更广。 减少散射光，从而大大提高检测灵敏度。检测池是 LIFD230的最大特点在于其使用的检测池是一 影响检测器性能的重要单元部件，分析科学家们从 种液相专用，适合于激光诱导荧光检测器的z一型 降低背景光源角度设计多种检测池。最先出现的流 反射式检测池。普通的无窗口式检测池从减低背景 动液滴式无窗口检测池，检测过程中激光直接照射 噪声方面提高检测灵敏度，与之相比，z．型反射 在液滴上，这种设计虽然消除检测出口的背景光干 式检测池可以最大限度采集经诱导产生的荧光信 扰，但是散射严重。另一种无窗口式检测池——鞘 号，从而提高检测器灵敏度。图1为检测池结构图， 流池是根据层流原理设计的，优势是将含有样品的 液体 由1流入，3流出，4为激光入射方向，2为 流出液注入到溶剂流的中心，在层流条件下，样品 反射镜片。由于反射镜片2将背离荧光接受光路的 流和溶剂流不发生?昆合，使溶剂起到保护壳的作用， 荧光反射到荧光采集系统，有效提高荧光采集效率， 同时也减小散射光干扰，Keller研究小组首先利用 进而提高检测器灵敏度 J。 鞘流吸收池完成单分子检测 】。这类专用检测池还