土家药刺老苞根皮干预骨折愈合机制探究.pdfVIP

摘要 目的： 运用土家药刺老苞根皮水煎剂对SD大鼠胫骨定位打孔骨折模型 进行干预，通过组织病理学、X．ray影像学、生物力学、骨密度、血 清及骨生化学、分子生物学(血管内皮生长因子1、2蛋白表达)等 技术较综合地评价其干预骨折愈合的疗效，并就其调控骨折愈合的机 制作一初步的探索。 方法： 建立大鼠胫骨骨折模型后，随机分为模型组、刺老苞根皮高剂量 组(以下简称高剂组)、刺老苞根皮中剂量组(以下简称中剂组)、刺 老苞根皮低剂量组(以下简称低剂组)、伤科接骨片组(以下简称中 药组)及左旋多巴组(以下简称西药组)，另设空白对照组(以下简 称空白组)，每组50只。按照骨折愈合分期要求，各组再按观测时间 点随机分成5个小组，每组10只，分别为4天组、7天组、14天组、 21天组、28天组。除正常组和模型组灌服蒸馏水外，其他各组依次 灌服：刺老苞根皮水煎剂高剂量、中剂量、低剂量、伤科接骨片混悬 液、左旋多巴片混悬液。在各时间点末，处死，取缸取材丁依歆通过 HE染色和X-ray片观察组织形态学变化；ICP．MS检测骨矿物质元素； 三点弯曲法测试右侧胫骨的生物力学；骨密度仪检测骨痂处骨密度： 含量及骨总胶原蛋白含量测定；免疫组化技术检测Flt．1、Flk．1蛋白 表达等相关试验。 结果： 1．组织形态学：骨折4天后，打孔边缘清晰；7天后，骨折部位 形成成熟骨小梁；14天后打孔边缘不慎清晰；21天后打孔边缘模糊； 28天后打孔边缘几近消失。刺老苞根皮不同剂量组骨组织愈合较模 型组快，以高、中剂量组更为显著。修复速度与对照组相近。 2．骨矿物元素指标：刺老苞根皮不同剂量组骨微量元素钙、磷、 镁、铜、硒、锰含量均高于模型组，以高、中剂量组更为显著的(与 对照组及模型组比较：PO．01)。 3．血清生化及骨生化指标：刺老苞根皮不同剂量组与模型组比 较，4天时无明显差异；7天。28天时，血清碱性磷酸酶活性升高， 血清骨钙素、羟脯氨酸含量增加，骨总胶原蛋白含量增加，以高、中 剂量组更为显著(与对照组及模型组比较：PO．01)。 4．免疫组化结果：4天时，骨痂处Fit．1和Flk．1表达较少，各给 Fit．1和Flk．1表达增强，以7天时最强，各给药组与模型组相比有差 异(P0．01，PO．05)；刺老苞根皮不同剂量组表达较其他各组强。 5．骨生物力学指标：胫骨结构力学和利带助学参数：挠度、载 荷、应力、应变等参数，模型组与空白组比，差异显著(PO．01)。 各给药组与模型组比，差异显著(PO．01)。 6．骨密度：骨折后4天、各组BMD值无显著差异(P0．05)，7 BMD值无明显差异(PO．05)。 结论： 1．刺老苞根皮在骨愈合过程中能刺激骨生成细胞增殖分化，缩 短骨痂形成时间，使骨修复提前进入重建期。 2．刺老苞根皮在骨愈合过程中提高血清碱性磷酸酶活性及骨钙 素、羟脯氨酸的含量，加速骨基质矿化，同时可增强骨总胶原蛋白含 且 里O 3．刺老苞根皮在骨愈合过程中不同程度的提高了骨缺损处 Flt、．1、Flk．1蛋白及mRNA的表达，加快骨愈合速度。这可能是刺老 苞根皮促进骨折愈合的分子机制之一。 4．刺老苞根皮在骨愈合过程中补充骨修复所需的锌、镁、铜、 锰、钙、磷等微量元素，增加骨痂骨密度和生物力学强度，提高骨愈 合质量。 echinocaulis 关键词刺老苞根皮，Aralia Hand．Mazz，骨折愈合， 形态学，血生化学，细胞信号因子 ABSTRCT Objective： 一 To evaluatecurative comprehensive effectofAraliaechinocaulis Hand．Mazzon fracture its intervening molecular healing，andexplore mechani