亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达ppar-γ mrn的影响.docVIP

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达p38MAPK 和MMP-9 的影响 魏倩萍 杨怡 邓华聪 赵劼 [摘要] 目的 观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达p38 p38MAPK和MMP-9的影响，研究二者在糖尿病肾病形成中的作用及硒在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法 在无预处理、10μmol/L p38MAPK特异性抑制剂SB203580预处理30min、100nmol/L亚硒酸钠预处理48h 3种情况下，分别以葡萄糖(25mmol/L)、胰岛素(100 nmol/L)、过氧化氢(100 (mol/L)和糖基化终产物(100 mg/L) 4种刺激因素孵育HBZY-1细胞，孵育时间分别为72、24、1、6h，同时设立对照组（0.01PBS）。用RT-PCR法检测HBZY-1细胞MMP-9表达。Western-blot法检测磷酸化p38MAPK蛋白表达。结果 上述4种刺激因素均可在无预处理条件下单独激活p38MAPK，使其磷酸化p38MAPK蛋白表达量（1.564± 0.055、1.474 ± 0.042、1.469 ± 0.051、1.359 ± 0.046），MMP-9 mRNA表达量（0.637 ± 0.013、0.562 ± 0.013、0.471 ± 0.015、0.438 ± 0.013）明显减少，与对照组比较（p38MAPK：0.297 ± 0.014；0.974 ± 0.015）差异均有统计学意义（P0.01）；SB203580预处理后，MMP-9 mRNA表达（0.861 ± 0.010、0.853 ± 0.016、0.744 ± 0.014、0.778 ± 0.008）增加，与相应无预处理单独刺激组比较差异有统计学意义（P0.01）；亚硒酸钠预处理后，磷酸化p38MAPK蛋白表达（0.450 ± 0.018、0.354 ± 0.014、0.378 ± 0.015、0.429 ± 0.015）被明显抑制，同时MMP-9 mRNA表达（0.884 ± 0.010、0.835 ± 0.017、0.870 ± 0.013、0.872 ± 0.011）增加，与相应无预处理单独刺激组比较差异有统计学意义（P0.01）。结论 在大鼠肾小球系膜细胞，p38 MAPK对p38 MAPK而上调MMP-9表达， p38 MAPK和MMP-9基因表达的变化在糖尿病肾病发生发展中可能起着重要作用。 基金项目：国家自然科学基金资助项目 作者简介：魏倩萍，女，博士，副教授，主要从事糖尿病及其并发症研究，已发表论文三十余篇 Email:wq163.com;通讯作者：邓华聪 Email: deng_ huacong@; 02368700611 [关键词] 亚硒酸钠；蛋白丝裂原激活蛋白激酶类；基质金属蛋白酶类； 糖尿病肾病；肾小球膜 A role of sodium selenite in regulating expression of p38MAPK and MMP-9 in rat mesangial cells line HBZY-1 WEI Qian-ping﹡, YANG Yi, DENG Hua-cong, ZHAO Jie. ﹡Department of Endocrinolgy, the First Affiliated Hospital，Chongqing Medical University, Chongqing 400016,China [Abstract] Objective To observe the effect of sodium selenite on expression of p38MAPK protein and MMP-9 mRNA in rat mesangial cells lines HBZY-1, and to study the role of p38MAPK and MMP-9 for diabetic nephropathy, and therefore to study the mechanism of sodium selenite in preventing diabetic nephropathy. Methods Rat mesangial cells lines HBZY-1 was incubated with glucose (25 mmol/L), insulin (100 nmol/L), H2O2 (100 (mol/L) and AGEs (100 mg/L) respectively. The relationship betw