苯酚提取- 超高效液相色谱法测定烟草中的磷酸腺苷.pdf

26 中国烟草学报　2014 年 2 月 第 20 卷 第 1 期 苯酚提取 - 超高效液相色谱法测定烟草中的磷酸腺苷 1,2 1 1 1 林小峰 , 吴玉萍 , 陈学军 , 孔光辉 1 云南省烟草农业科学研究院，分析测试中心，云南省玉溪市高新开发区南祥路 14 号 653 100 ； 2 云南大学，材料科学与工程系，云南省昆明市五华区翠湖北路 2 号 65009 1 摘　要：建立了苯酚提取超高效液相色谱法 （UPLC ）同时测定新鲜烟叶中三磷酸腺苷 （ATP ）、二磷酸腺苷 （ADP ）和单磷酸 腺苷 （AMP ）的分析方法。苯酚提取样品溶液中的ATP 、ADP 和 AMP 较稳定，不易水解，样品在 2 h 以内各磷酸腺苷变化率小 于 10% 。采用 6‰三乙胺 （pH=6.6 ）和甲醇作为流动相梯度洗脱，3 种磷酸腺苷在 10 min 内实现了较好的分离，线性范围 （5 ～200 ） μg/mL 内，磷酸腺苷浓度与峰面积相关性很高 （r0.9999），3 种磷酸腺苷检测限均小于0.5 μg/mL，回收率在 91.68 % ～ 110.79 % 之间， RSD 在 1.53 % ～ 3.67 % 之间。 关键词：超高效液相色谱；磷酸腺苷；苯酚；新鲜烟草 doi ：10.3969/j .issn.1004-5708.2014.01.005 中图分类号：TS411　　　文献标志码：A　　　文章编号：1004-5708 （2014 ）01-0026-06 Determination of adenosine phosphate in tobacco leaf by UPLC with phenol-TEA pretreatment 1,2 1 1 1 LIN Xia ofeng , WU Yuping , CHEN Xu ejun , KON G Guanghui 1 Analy sis Test Center, Yunnan Academy of Tob acco Agricultural Science, Yuxi 653 100, China; 2 Dep artment of Materials Science and Engineering, Yunnan Univer sity, Kunming 65009 1, China Abstract ： A analytical method for simultaneous determination of adenosine triphosphate (ATP), adenosine diphosphate (ADP) and adenosine monophosphate (AMP) in fresh tobacco leaves was established by ultra high performance liquid chromatography (UPLC) with phenol extraction. ATP, ADP and AMP in phenol extraction were stable and difficult to be hydrolyzed with rate of change less than 10% within 2 hours. A better separation of ATP, ADP and AMP was achieved in 10 minutes by utilizing a gradient elution system of 6 ‰ triethylamine (pH = 6.6) and methanol as mobile phas