石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒.pdf

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石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒

石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒 Cat. MD 产品简介: 从固定在福尔马林中提取和纯化出来的蛋白,可用于 western blot ,RPA ,质谱,2D 电泳 分析。 产品组成: 编号 名称 规格 数量 存储温度℃ 石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒 50次 1 10002 蛋白提取缓冲液 EXB 5ml 1 -20℃ 10003 二甲苯 5ml 1 常温 10004 正庚烷 5ml 1 常温 10005 β-巯基乙醇 300ul 1 常温 10006 甲醇 30ml 1 常温 10007 氯仿 5ml 1 常温 说明书 份 1 常温 试剂盒成分保存 提取缓冲液 EXB 应存放在–20 °C 。FFPE 试剂盒中其它的组分应存放在室温干燥环境 (15 –25 °C )。FFPE 中的其它成分正庚烷,甲醇,氯仿应储存在适当的储藏柜中,此条件 下,该试剂盒至少可以稳定保存 12 个月。 载玻片上的石蜡组织切片脱蜡 用户须自备的设备和试剂: 100%,96%,和 70% (V / V )乙醇 石蜡包埋切片脱蜡罐 实验开始前注意事项: 二甲苯清洗(步骤 1 和 2 )应在通风橱内进行 实验步骤: 1、将载玻片转移到一个合适的装有二甲苯的容器中,玻片要被二甲苯完全覆盖,室温(15-25 °C )孵育 10min。 2 、重复步骤 1 两次,每次使用新的二甲苯。 3、将玻片放入 100%乙醇中室温孵育 10min,使用新的 100%乙醇重复此步。 4 、将玻片转移到一个含有96%的乙醇的容器中孵育 10 min,使用新的 96%乙醇重复这一步 骤。 5、将玻片转移到一个含有70% 的乙醇的容器中孵育 10 min,使用新的 70% 乙醇重复这一步 骤。 6、浸在双蒸馏水中30s,用纸巾小心地擦去玻片上的水。 注意:纸巾不要触碰到组织,确保组织不要干。 7、用针划下需要的组织转移到 1.5ml 离心管中。 8、从FFPE 组织切片中提取的总蛋白可进行进行 western blot 。 直接从一块石蜡包埋样 中脱蜡 用户须自备的设备和试剂 微型离心机(适合于 1.5ml 离心管) 涡旋混合器 100%, 96%, and 70% (v/v) 乙醇 实验开始前注意事项: 所有离心步骤都是在 20 –25 °C 使用台式进行离心(例如,Eppendorf® Micro Centrifuge 5417C or HeraeusBiofuge® 15 )。 二甲苯洗涤应在通风橱内进行。 实验步骤: 1、从同一块组织中切 3 片 10 –15 μm 厚切片。 2 、立即把切片放在 1.5 毫升离心管中(提供)。 3、向管子中加入 1ml 二甲苯,用力涡旋 10s,孵育 10min。 4 、将管子放入微型离心机中全速离心2min ,小心弃掉上清。 5、重复步骤 3,4 两次。 6、加入 1ml 无水乙醇到包含有颗粒的管子中,涡

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