扁藻光合甘油脂的uplc-q-tof-ms 鉴定 - science china press.pdfVIP

中国科学 C 辑 :生命科学 2008 年 第 38 卷 第 12 期 : 1177 ~ 1183 SCIENCE IN CHINA PRESS 扁藻光合甘油脂的UPLC-Q-TOF-MS 鉴定 * 李海英, 严小军 , 徐继林, 周成旭 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室, 宁波 315211 * 联系人, E-mail: yanxiaojun@ 收稿日期: 2008-08-28; 接受日期: 2008-09-26 教育部长江学者和创新团队支持计划(批准号 : IRT0734), 国家高技术研究发展计划(批准号: 2007BAD43B09)和宁波大学王宽诚幸福基金 资助项目 摘要 运用超高效液相色谱- 四级杆飞行时间质谱联用分析系统(UPLC-Q-TOF- 关键词 MS), 直接分析总脂并建立了海洋扁藻(Tetraselmis chuii) 中光合甘油脂的精确结构鉴 扁藻 定方法. 质谱采用电喷雾电离源(ESI), TOF 采用V 飞行模式, 分别在正负离子模式下 光合作用 对总脂进行检测. 根据在ESI-MS/MS 下各种甘油脂产生的特征离子碎片对甘油脂进 甘油脂 UPLC-Q-TOF-MS 行结构鉴定, 并根据负离子模式下产生的羧酸阴离子, 确定各个甘油脂分子的脂肪 酰基组成. 结果从扁藻中共检测到 40 多种甘油脂, 包括 11 种单半乳糖甘油二酯 (MGDG), 7 种双半乳糖甘油二酯(DGDG), 16 种硫代异鼠李糖甘油二酯(SQDG)和9 种 磷脂酰甘油(PG), 对这种微藻进行光合甘油脂的结构鉴定还不多见. 此外, 还鉴定出 了一些传统 GC-MS 方法检测不到的羟基化脂肪酸, 提供了扁藻光合脂质组的新信 息. 通过对sn-2 位脂肪酸的比较研究表明, MGDG 和SQDG 主要通过原核途径合成, PG 的形成是一种混合型生物合成途径; 而DGDG 在sn-2 位特有C14:0 和C16:0. 这 种方法提供了所有光合甘油脂的完整结构图谱, 可以通过监测脂类的变化运用于海 洋微藻的生理生态研究中. 高等植物和海洋藻类的光合脂质组大部分由 C-16 或C-18 脂肪酸, 但sn-2 位只有C-18 脂肪酸, 此 甘油脂组成, 根据极性基团甘油脂主要分为 4 类, 即 类由位于内质网的真核生物合成途径合成. 然而海 单半乳糖甘油二酯(monogalactosyldiacylglycerol, 洋藻类中酰基的这种选择性机理尚不清楚[3]. 另一方 MGDG), 双半乳糖甘油二酯(digalactosyldiacylglycerol, 面, 最近的研究表明一些蓝藻(Cyanobacteria), 如原 DGDG), 硫代异鼠李糖甘油二酯(sulfoquinovosyldia- 绿球藻(Prochlorococcus)主要合成SQDG而不是磷脂, cylglycerol, SQDG)和磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol, 这使得需重新认识磷缺乏初级生产力评估[4]. 此外, PG)[1,2]. 脂类组成显示出光合作用谱系的进化轨迹并 光合作用膜的特定排列在很大程度上可以由膜脂的 具有化学分类学意义: 质体脂, 至少在高等植物中, 含量调节: 脂类的不饱和性可以稳定类囊体膜的流 由两种分子种类组成. 第 1 种在甘油骨架的sn-1 位主 动性, 这对于确保光合反应的顺利进行是不可缺少 要为C-18 脂肪酸, sn-2 位只有C-16 脂肪酸, 此类由位 的[5,6]; 浮游植物群落在低温和低光强度条件下合成 于质体的原核生物合成途径合成; 第 2 种在sn-1 位为