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microRNA212对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭力影响的研究 应江辉 摘 要 背景: 胃癌是我国发病率最高的恶性肿瘤，目前治疗的首选方法仍然是以手术为主的综合性治疗，但对于进展期胃癌术后效果并不理想，而胃癌的复发和转移是造成死亡的主要原因，因此，寻找有效途径干预胃癌转移，进而提高患者的生存率具有重要意义。 microRNA是近年发现的一种不编码蛋白质的内源性小RNA（21～23个核苷酸）。但是它能够在转录后水平调节靶mRNA的稳定性和转录效率,通过对靶基因的调控而影响细胞增殖，分化和凋亡等过程，从而高效调控癌基因抑癌基因的表达，。microRNA据生物信息学预测人类至少有1000种miRNA，并可调节至少30%人类基因目前已经鉴定的miRNA有700多种。miRNA通过与靶基因的3′UTR 区互补配对，指导miRN复合体对靶基因mRNA进行切割或者翻译抑制，。转移相关miRNA组合的茎环RT-PCR技术对胃癌转移相关miRNA进行筛选，发现RNA-212对与胃癌淋巴转移密切相关， 目的: 研究人miRNA-212（miR-212）对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响。意在通过miRNA生物学功能及作用靶点研究，期望找到胃癌生物治疗新的靶标，提高胃癌靶向治疗的准确性。 :通过化学方法合成成熟型的人miR-212抑制基因i-mi-R212，分别以25、50、75、100 nmol/L浓度通过脂质体转染方法转染SGC7901细胞，同时设空白和无关序列转染对照组。进一步利用Real-time PCR、细胞计数和Transwell侵袭实验方法，分别检测各组细胞miR-212的表达、miR-212对细胞增殖的影响、及对细胞的迁移和侵袭能力的影响。 结果: 各浓度 i-miR-212转染SGC7901细胞后，miR-212表达均降低，以50 nmol/L i-miR-212转染组最佳，较无关序列转染组降低约18倍；i-miR-212 (50nmol/L)的转染组与对照组在细胞计数实验存在明显差异（p=0.000.01）,提示抑制miR-212表达可促进细胞增殖。在细胞侵袭试验中i-miR-212 (50nmol/L)的转染组透膜细胞明显多于对照组（p =0.000.01），提示抑制miR212表达可提高细胞侵袭能力，在迁移试验中i-miR-212 (50nmol/L)的转染组透膜细胞明显多于对照组（p=0.000.05），提示抑制miR212表达可提高细胞迁移能力 结论: 转染成熟型人i-miR-212能使胃癌细胞系SGC7901中miR-212的表达明显下降,并能显著促进胃癌细胞系SGC7901的增殖、迁移及侵袭能力，表明miR-212可能与胃癌肿瘤细胞的转移有关。 关键词：miRNA, 胃癌, 转移淋巴结, miRNA-212，migration and invasion of gastric cancer cell lines SGC7901 Abstract Background: Gastric cancer the highest incidence of the most malignant tumors in china, the most preferred treatment for gastric cancer treatment is Operation oriented comprehensive treatment. But the result of the advanced gastric cancer after operation is not ideal, Relapse and metastasis are the main causes of death caused by gastric cancer. Therefore, to find an effective way to intervene the metastasis of gastric cancer is significantly. MicroRNA discovered in recent years is a kind of do not code for protein endogenous RNA ( 21 ~ 23 nucleotides). But it can regulate target mRNA stability and efficiency of transcription in the posttran