minute tm 总蛋白提取试剂盒（动物细胞和组织） - 英文特生物技术.pdfVIP

Invent Biotechnologies, Inc. MinuteTM 总蛋白提取试剂盒 （动物细胞和组织） 目录号SD-001/SN-002 描述： Minute TM 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒，由优化细胞裂解液和离心管柱及2.0ml 接收管组成，能够快速从 动物细胞和组织（无脊椎动物和脊椎动物）中提取总蛋白，用于蛋白质分析和进一步纯化。试剂盒同时提供 天然和变性两种不同的裂解液，可供用户选择。离心管柱技术提取蛋白质，样品量最小可处理 20ul ，最大可 达500ul。从细胞/组织中提取总蛋白质仅需1-8 分钟，得率可达2-8mg/ml。 应用： 可应用于SDS, immunoblottings, IP, ELISA ，酶检测及其他应用，蛋白质分析和小规模蛋白层析纯化 试剂盒组分 1. 25ml 变性细胞裂解液（SD-001） 2. 25ml 天然细胞裂解液（SN-002） 3. 50 个离心管柱 4. 50 个收集管 5. 4 根塑料研磨棒 储存 ： 天然细胞裂解液（SN-002）储存于4℃，其他部分储存于常温 重要产品信息 1.蛋白酶抑制剂不是必须加入，但是如果下游实验需要较长时间或者蛋白提取后保存较长时间，建议添加蛋 白酶抑制剂。推荐使用BCA （Pierce）试剂盒用于蛋白浓度测定。研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用 前加入裂解缓冲液。 1 Tel ：4006468368 Email ：support@ 英文特生物技术（北京）有限公司 Invent Biotechnologies, Inc. 2.裂解液的选择要根据下游实验来决定，SD-001 变性裂解液适合用于SDS，WB 实验，SN-002 天然裂 解液适合用于ELISA ，IP ，CO-IP 等实验。 3.使用SD-001 变性裂解液提取的蛋白，做WB 上样前，仍需和loading buffer 混匀煮制样品。 所需附加材料 1XPBS 涡旋震荡仪 台式离心机 BCA 蛋白定量试剂盒 操作方法： 细胞样品总蛋白提取 变性总蛋白提取（SD-001） A ．非贴壁细胞 1.将离心管柱及接收管套管放在冰上预冷。 2.低速离心收集细胞，在 1.5ml 离心管中加入预冷的PBS ，旋窝震荡,3000rpm 离心2-3 分钟清洗细胞。吸去上 清，剩余与细胞体积相同体积的PBS 。涡旋震荡重悬细胞。 3.加入表格1 中相应体积的细胞裂解液，涡旋震荡裂解细胞。（细胞数量和裂解液须保证对应关系，以达到最 佳提取效率）请注意：部分未完全裂解的细胞不会影响样品质量。 4.将裂解的细胞转移到预冷的离心管柱套管中，14000-16000rpm 离心30 秒取出 5.立刻将收集管放置于冰上，弃去离心管柱，蛋白提取完成可应用于下游实验。 表格1 ，不同细胞体积应加入相应体积裂解液 细胞体积（ul） 裂解液（ul） 6 相当细胞量# X 10 3 20 0.3 5 50 0.5 10 100 1 20 200 2 40 500 3 6 ﹡NIH3T3 和293T 细胞10ul 体积相当于1X10 个细胞