hissep ni-nta 6ff chromatography column, 1ml his 标签蛋白 .pdfVIP

上海翊圣生物科技有限公司 客服热线：4006-111-883 E-mail: order@ HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 1ML His 标签蛋白纯化预装柱，1ML 产品信息 产品名称 产品编号 规格 储存 HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 1ML （His 标签蛋白纯化预装柱，1ML） 20505ES03 1ml 4 ℃ HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 1ML （His 标签蛋白纯化预装柱，1ML） 20505ES08 5×1ml 4 ℃ 产品描述 HisSep Ni-NTA Agarose Resin 6FF 以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质，通过化学方法偶联四配位的氮川三乙酸（NTA ） 为配体，螯合镍离子（Ni2+ ）后，形成非常稳定的八面体结构，镍离子处于八面体的中心，这样的结构可保护镍离子免受小 分子的进攻，更加稳定，可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件。此外，因其基质的耐压性（该基质可以 耐受最高0.3 MPa 的压力），该产品可以用于工业大规模蛋白的纯化，可在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化。 HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column 是一种以HisSep Ni-NTA Agarose Resin 6FF 为填料的中压预装柱，该预装柱 具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA 等，方便客户用于纯化His-tag 蛋白。 产品性质 基质（Matrix ） 高度交联的6%琼脂糖凝胶 粒径（Bead size ） 45-165µm 载量（Capacity ） ＞40mg 6×His-tagged protein/ml 基质 耐压（Tolerance Pressuremax ） 0.3MPa, 3bar 储存缓冲液（Buffer ） 含20% 乙醇的1×PBS 柱子尺寸 （Column Size ） 0.7×2.5cm （1ml） 运输和保存方法 冰袋运输。4 ℃保存。有效期2 年。 注意事项 1）建议纯化所用缓冲液和蛋白溶液经0.22µm 或0.45µm 滤膜过滤后上柱使用。 2 ）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用方法 （一）纯化流程 1 缓冲液的准备 缓冲液使用原理：低咪唑上样，高咪唑洗脱，或者高pH 上样，低pH 洗脱。Buffer 在使用前最好用0.22µm 或0.45µm 滤膜 过滤除菌。可溶性组氨酸标签蛋白纯化所需配方详见附表1。包涵体组氨酸标签蛋白纯化所需缓冲液及配方详见附表2 。 2 样品准备 2.1 细菌表达的蛋白 （本说明以细菌表达蛋白为例） 1）挑取单菌落到含有适合抗性的LB 培养基中，根据载体说明加入相应的诱导剂诱导相应的时间。 2 ）表达结束后，将培养液转至离心瓶，7000rpm，离心 15min，收集菌体，然后加入 1/10 体积的裂解液（Lysis buffer ）和 PMSF （PMSF 在破碎前加入，其终浓度为 1mM），同时也可加入其他蛋白酶抑制剂，但不能影响目的蛋白与树脂的结合。 3 ）之后加入溶菌酶，使其工作浓度为1mg/ml 。【注】：如果表达的宿主细胞内含pLysS 或pLysE ，可以不加入溶菌酶。 网址： 第1 页，共5 页 上海翊圣生物科技有限公司