心血管疾病的蛋白质组学研究现状.pdfVIP

中国微循环2004 年 12 月第 8 卷第 6 期 ·411 · ( ) 文章编号 : 1007 - 8568 2004 06 - 0411 - 05 ·综述 · 心血管疾病的蛋白质组学研究现状 徐菲菲 , 刘秀华 中图分类号: Q51 ; R714. 252 文献标识码 : A 心血管疾病严重威胁人类健康 , 深入研究其发 病与防治机制具有重要意义。器官、亚细胞和分子水 平的研究表明 , 心血管疾病的发生和发展涉及动态、 复杂、精细的细胞内过程。作为细胞的基本功能单 位 , 蛋白质是生命活动的执行者 , 广泛参与细胞的功 能与调节 , 在病理条件下发生改变 , 决定细胞、组织 和器官的表型 1 。2001 年人类基因组计划完成 ,通过 对人类基因组结构及其特性的研究 , 可以获得很多 基因翻译产物 —蛋白质 , 但仅仅通过基因组技术还 无法推测这些蛋白质的翻译后修饰。对人肝样品分 析表明 , mRNA 的数量与相关蛋白质丰度之间的相关 系数仅为 0. 48 2 , 这一低相关性表明系统研究蛋白 质是揭示生命活动规律 , 从分子水平认识疾病本质 的关键。相对于基因组而言, 后者称为蛋白质组 , 包 括细胞或有机体在特定时间内直接由基因转录或经 翻译后修饰的所有蛋白质 3 。通过对正常及病理个体 图 1 蛋白质组学研究步骤 间蛋白质组的比较分析 , 可以找到某些疾病特异性 的蛋白质分子 , 作为疾病早期诊断的分子标志或新 样本处理是影响双向电泳效果和重复性的最主 药设计的靶点 , 从而为心血管疾病的发病机理与防 要因素。为了获得高质量的样本 ,首先必须有效地裂 治提供新的思路。 解细胞 , 使其内容物完全溶解 , 消除样本中蛋白质间 1 心血管疾病研究中蛋白质组技术的应用 的相互作用 ,并有效地去除核酸等非蛋白质成分。该 ( ) 蛋白质组 Proteome 的概念是 1994 年由 Wlikins 过程应尽量减少对蛋白质的化学修饰和解聚影响 , 和 Williams 首次提出的4 ,主要包括蛋白质的分离鉴 将蛋白酶对于蛋白质水解的作用减小到最低限度。 ( ) 定和对蛋白质修饰本质及发生部位的描述 , 其目的 心肌组织 细胞 富含肌原纤维 , 为避免当高丰度蛋 ( 是利用双向凝胶电泳 Two-dimensional el electro hore 白质存在时, 辨别低丰度蛋白质效率不高 , 以及某些 g p ) ( ) sis ,2 - DE 和质谱 mass s ectrometr ,MS 等技术对蛋 特殊种类蛋白如基础蛋白、膜蛋白未被充分代表等 p y ( 白质进行分析, 建立包含蛋白质鉴定和相应功能特 问题, 可利用其固有化学特性 生物专一性、疏水性、