triton x-100 与牛血清白蛋白的相互作用.pdfVIP

第 卷 分析化学（ ）研究简报 第 期 8# ;MN*O ?P.*PM E 年 月 8 E QB)HRH S(%)A3 (T .)A3U’/A3 QBH0R’%U E77 F @! !#$% ’()** 与牛血清白蛋白的相互作用 魏晓芳 刘会洲! （中国科学院化工冶金研究所分离科学与工程青年实验室，北京 !#） 摘 要 应用荧光光谱法研究了溶液体系中 （ ）与牛血清白蛋白（ ）之间的相互作 $%’() *+! $* ,-. 用。实验表明 对 的荧光有较强的猝灭作用，二者形成不发荧光的复合物所产生的静态猝 $* ,-. 灭是引起 荧光猝灭的主要原因。从荧光猝灭结果求得二者的结合常数，发现在不同 浓度 ,-. $* 下，结合常数 及络合个数 均不同；低于 的 ， ， ，高于 ， ! $* /0/ ! 1 22 0(34 5 1 67! /0/ ! 1 ! ， 。疏水作用是 与 相互结合的主要驱动力。 0(34 5 1 628 $* ,-. 关键词 牛血清白蛋白，荧光光谱 ) 引 言 血清白蛋白在哺乳动物体内起着重要的贮存和输运作用，它能与多种内源和外源性物质结 〔〕 合! 。在实际应用中非离子表面活性剂与该种蛋白共存的机会甚多，因而了解非离子表面活性剂 与蛋白质之间的相互作用在理论及应用技术上有着重要的意义。不带电荷的非离子表面活性剂与 〔〕 蛋白质的相互作用通常是很弱的，有的甚至没有作用，它们一般不改变蛋白质的二级结构8 。在以 〔〕 9 往的报道中，人们用于研究非离子表面活性剂与蛋白质作用的手段有表面张力法 、平衡渗析法和 〔〕 量热法2 等技术。运用灵敏、快速、简便的内源荧光法研究非离子表面活性剂与蛋白质的相互作用 尚未见报道。本文借助荧光技术研究了$%’() *+! 与牛血清白蛋白之间的结合反应，初步探讨了 $%’() *+! 对牛血清白蛋白荧光的猝灭机理和两者之间的相互作用。 + 实验部分 +,) 试剂和仪器 牛血清白蛋白（ ）为 公司产品。 （文中简写为 ）为 公司产品。实验用 ,-. ,: $%’() *+! $* ;3/= 水为去离子二次蒸馏水，所用溶剂均为 为 的磷酸缓冲溶液。样品测定均在日立 ! 00(34 5 ? @ 6 公司?’A/B ;-+2C 型荧光光谱仪上进行。 +,+ 实验方法 在 的容量瓶中，依次加入一定量的牛血清白蛋白（ ）、 溶液，用 的缓冲溶液稀 C 05 ,-. $* ? @ D 释至刻