血液一般检查 见习2.pptVIP

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1血液一般检查见习2

容量、电导、光散射检测原理(VCS) Volume conductivity light scantter Volume:应用电阻抗原理测量细胞体积 Conductivity:根据细胞壁能产生高频电流的性能,采用高频电磁探针,测量细胞内部结构,即以细胞核和细胞质的比例、细胞内颗粒的大小和密度,来辨别体积相同,但性质不同的两个细胞群体。 Light scatter:来自激光的单色光直接扫描进入计数敏感区的每一个细胞,根据细胞产生的不同角度的散射光(10~70),可提供细胞形态、核结构等光散射信息,并能鉴别细胞颗粒的构型和质量(粗颗粒的光散射比细颗粒更强);光散射可区别粒细胞的类型。 * Beckman Coulter STKS * 血涂片制备 Preparing blood smear * Wright-Giemsa solution ingredients 酸性染料伊红(钠盐)和碱性染料美蓝(氯盐) 伊红钠盐有色部分为阴离子,可与带正电荷的物质结合。 氯化美蓝有色部分为阳离子,可与带负电荷的物质结合。 二者溶解在甲醇中形成可溶性的伊红化美蓝溶液,既可以固定细胞又利于细胞蛋白质选择性地吸附其中有色离子而着色。 氯化美蓝放置久后可氧化为天青,对细胞核染色加强,添上更多色彩,染色效果更好。 * Wright-Giemsa staining principle 血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与酸性染料伊红结合而染成红色。 细胞核的核蛋白与原、幼细胞的胞质为酸性物质,故与碱性染料美蓝和天青相结合,染成深蓝色或深紫红色。 中性颗粒与美蓝和伊红同时结合而染为淡紫红色。 瑞氏染粉是由伊红化美蓝组成,对胞质及中性颗粒的着色性极佳,面姬姆萨染粉由天青、伊红组成,对细胞核着色较好,结构显示更清晰。 蛋白质所带电荷随溶液的 pH而定。故为使血片每次染色效果好且趋于一致,需配制pH6.4~6.8的缓冲液。 * Wright-Giemsa staining procedure 滴加瑞-姬复合染液数滴于血涂片上(以盖住血膜为度),静置约半min,目的在于用染液的甲醇成分固定血细胞。 加相当于染液2倍量的缓冲液充分混匀。 染色约l0min,用水冲去染液,干燥后镜检。 * 白细胞分类计数 White blood cell differential count,DC 先用低倍镜选好薄厚适宜、染色良好、细胞分布均匀处,再用油浸镜观察。 通常计数100个白细胞。 按图所示方向移动血涂片,将所遇到的各类白细胞分别记录,直到计数100个白细胞为止。 计算每类白细胞的数目,即其百分数值。 Neutrophils (band) 1~5% Neutrophils (segmented) 50~70% Eosinophils 0.5~5% Basophils 0-1% Lymphocytes 20-40% Monocytes 3~8% * 血细胞形态学识别规律 原则:核浆兼顾,以核为主 次序:胞体、胞浆、胞核、核仁 * 红细胞形态 * 红细胞大小不均(anisocytosis) * 红细胞结构异常 Howell-Jolly body,Cabot ring * 球形红细胞 椭圆形红细胞 口形红细胞 棘形红细胞 * 靶形红细胞 泪滴形红细胞 镰形红细胞 * 锯齿形红细胞      棘形红细胞 * 红细胞缗钱状形成 * Neutrophils 胞体10~15μm 胞浆量多,淡红色,含许多淡紫红色小颗粒 胞核 band 凹陷的程度超过核直径的一半,核最窄径大于最宽径的1/3,核弯曲成带形、S形、U形、W形等。核染色质粗糙,浓集成小块状,染色不均匀。 Segmented 通常分2~5叶,彼此间有较细的核丝或较粗的核桥,核最窄径小于最宽径的1/3 。核染色质 粗糙。 * Lymphocyte Large lymphocyte 胞体12~18μm,圆形。胞浆天蓝色,透明,可有少数较大的嗜苯胺蓝颗粒。胞核类圆形,核染色质固缩成一团,染成紫红色,着色比小淋巴细胞为淡。有时刻隐约可见核仁痕迹。 Small lymphocyte 胞体5~10μm,圆形或椭圆形。胞浆甚少,几近无浆,或在核凹陷侧可见少量蓝色胞浆,颗粒可有可无,常因胞浆过少而看不到颗粒。胞核占细胞的极大部分,圆形或豆形,核染色质凝缩,染成紫红色,无核仁。 * Monocytes 胞体圆形或不规则形,12~20μm 胞浆较多,淡灰蓝色,可见灰尘洋细微红色或红紫色颗粒(嗜苯胺蓝颗粒) 胞核呈肾形、马蹄形或分叶状等,有的扭曲折叠,偶见圆形核的。染色质

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