缺氧对食管癌Eca109细胞系HIF-1α和VEGF表达及放射敏感性的影响.pdfVIP

第 29卷第 6期 河 北 医 科 大 学 学 报 Vo1．29 No．6 2OO8年 11月 J()URNAI0FHEBEIMEDICAIUNIVERS1TY Nov． 2OO8 ·815 · 论 著 缺氧对食管癌 Eca109细胞系HIF一1和VEGF 表达及放射敏感性的影响 张洪珍 ，赵建晖 ，赵晓晖 ，祝淑钗n ，刘 斌 (1．河北省人 民医院放疗科 ，河北 石家庄 O5O051；2．河北省人 民医院普外科 ，河北 石家庄 O50051； 3．河北医科大学第 四医院放疗科 ，河北 石家庄 O5。011) 【摘要】 目的 观察化学缺氧剂二氯化钴 (Coclz)诱导缺氧条件下，Eca109食管癌细胞 中缺氧诱导因子一1a (hypoxiainducIb1efactor1a，HI卜1a)和血管 内皮生长因子(vascu1arendothelialgrowthfactor，VEGF)表达 的变化 ， 并观察缺氧对放射敏感性 的影响。方法 cocl。用于建立 Eca1O9食管癌细胞体外缺氧培养模型，并设对照组 (cocl浓度为O “m0l／I)。观察缺氧培养不同时相 (o、8、16、24h)Eca1O9细胞 HIF_1a和 VEGF的表达及对放射 敏感性的影响。反转录聚合酶链反应方法检测 HIF—la和 VEGFmRNA 的转录水平 ，免疫 印迹实验 (Western B1ot)检测 HIF一1a和 VEGF蛋 白表达情况 。集落形成实验观察细胞的放射敏感性 。结果 逆转录聚合酶链反应检 测HIF_1d和 VEGFmRNA结果显示 ，coc12缺氧处理后(O、8、16、24h)，HIF_1a和VEGFmRNA表达增加；但随 着缺氧时间的延长 (8、16、24h)，HI 1“mRNA 的表达没有明显改变 (PO．O5)；VEGFmRNA转录在缺氧培养 8、16、24h后显著升高，且不同时间组间存在显著性差异 (PO．O5)。westernBlot检测结果显示 ，缺氧处理后 HIF_1a和VEGF蛋白表达显著提高(Po．o5)。克隆形成实验结果显示，照射 4Gy后 ，缺氧加放射组、单纯放射 组细胞存活分数分别为48．3 和21．7 (PO．O5)。结论 食管癌细胞系Eca1Og在缺氧条件下，HIF_1a和VEGF 蛋 白表达上调 ，放射敏感性降低 。 【关键词】 食管肿瘤；缺氧；辐射耐受性 【中图分类号】 R735．1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1o07—32O5(2008)O6一O815—04 EFFECT oF HYPoXJA ON HIF一1aAND VEGF EXPRESSIoN AND RADIoSENSITIVITY IN ESoPHAGEAL CANCER CELL LINE Eca1O9 ZHANG Hong—zhen ，ZHAo Jian—hui，ZHAO Xiao—hui，ZHU Shu—chai¨，IIU Bin (1． pnr￡m 0，R“n￡0 O foZog ，eP oZe HospfnZ0_厂H 6P Pro ，2cP，Sh巧 以^口gO5OO51，( n； 2． nr￡7 ￡o厂Srgr ，砘 P 。ZP Ho户f(Z【o厂He6P Pr0 f，S n^n g，O50O5lG 口； 3． 户口r￡ ￡o，Rn o0g ，冼eF0“r￡^H0sp ￡nz0_厂HP6 M fnzL7 Pr ￡，Sh n^dgO5OO11，(^ 口) ABSTRACT：objectiveToinvestigatethechangeofhypoxiainducIb1efactor一1仅(HIF一1a)and vascu1arendothelialgrowthfactor(VEGF)and