与苹果柱型基因(Co)紧密连锁的分子标记的筛选.pdfVIP

第2期 王彩虹等：与苹果柱型基因((b)紧密连锁的分子标记的筛选 近等基因池，这样也可以大大减少非真正特异片段 标记的一些报道”‘‘”’，但总体来说，此项工作还有 的干扰。 待进一步开拓。本研究中我们借助于分子标记技术 2．2特异片段与cb基因的共分离分析将在亲本AFLP在短枝富士和柱型苹果品种TelaIIlon的后代 与近等基因池间初步筛选到的差异片段在后代分离 分离群体中寻找与(1。基因连锁的分子标记，实践 群体中验证，用相同的引物对分离群体中的个体基 证明AFLP的高效性、稳定性是RAPD远远无法比 因组进行AFLP分析，结果表明，柱型个体上出现拟的，所以AFLP在果树分子标记的研究上有着十 该特异片段，而普通型个体上则无此片段的扩增 分诱人的前景，应尽快加以推广和应用。我们筛选 (图2)，即片段A与柱型性状表现为共分离现象，到的标记与(10基因的重组率为33士2．3％，可以作 所以A确实为与(To基因连锁的标记片段。对60个为柱型苹果育种中辅助选择的十分有效的标记，这 F，个体(柱型、普通型各30个)的研究发现．其也是目前发表的与。基因距离最近的标记。但是 AFLP是一种受专利保护的技术，涉及的技术又比 中有2个个体为重组类型，x2=o．叭7，符合l：l的 分离比例。特异性DNA片段A在后代的重组率为较复杂，成本很高，限制了其在生产上的应用．所 3．3士2．3％． 以很有必要将该AFLP标记转换成常规的以PcR为 2．3拷贝数的检测southem杂交结果表明片段A基础的scAR标记，以便直接用于辅助选择。另外， 确实来自苹果基因组，在柱型苹果基因组中为单拷 由于该标记距离目的基因较近，又为单拷贝序列， 贝，而在普通型苹果基因组中不存在(圈3)。所以 所以对(10基因的图位克隆及苹果基因组作图有重 这是一个十分理想的分子标记。对这样的标记，通 要意义。目前，o基因标记的数量仍然很少，而且 过序列)则定后，可设计一对PcR特异引物，不但有精细作图还未展开，因此有必委继续寻找更多、更 近的标记。 望于作为简单的scAR(sequencecharacterizedAm— pl讯edRegion)标记，非常方便地用于辅助选择，而 且也可以作为sTs(sequenceTaggedsite)标记求 界定基因组的特异位点”1，sTs是遗传图谱和物理 参考文献 图谱整合的共同位标．在人类基因组作图上已经发 1 KOlnheriranceof 1n J 挥了非常重要的作用””。 Lapins compactgrowthtypeapple AmerSocHonScI．1976．101：133一135 3讨论 KR columnaratEast Acta— 2TobunBreedi“g 8pp】e Ma】l¨19 近年来，分子标记技术在果树上的应用已很普 Honicullurae．1985，159：63—68 遍，诸如品种鉴定、资源分类等。同时，也展开了 3戴洪义，王善广．干士梅，等拄型苹果引种研究果树¨ 与重要农艺性状连锁的分子标记的研究，主要目的 学．1998，15(1)13～19 4邱芳，献琏臣，金德敏，等遗传多样性的铲子检测生拘 是为了在育种过程中利用标记辅助选择来提高效率， 50