大豆转基因方法综述.pdfVIP

1 现代生物科技专题 2012 年 大豆转基因方法综述 李一玮 （北京大学附属中学，北京海淀区 100190） 摘要 介绍并评论了几种主要的大豆转基因方法 关键词 大豆；转基因方法 The Summary of Transgenic Technology of Soybean 非常有效的，但在大豆愈伤组织的诱导过程 大豆最先起源于中国，不但是人类主要 有时会存在困难，可以转移大片段外源基因 的油料作物和植物性蛋白来源，而且是重要 (30kb)，没有明显的基因重排现象，外源 的工业原料。植物转基因技术作为一种新兴 基因主要以单拷贝插人植物基因组等优点。 的生物技术手段，在提高产量、抗性育种以 1．2 基因枪法 及缩短育种周期等方面有着明显的优势。早 基因枪法又称微弹轰击法。这种技术是 在1988年，McCabe和Hinchee分别用基因枪 借用高压气体或高压放电为动力，用微粒对 轰击大豆未成熟胚生长点和用农杆菌侵染 植物组织进行轰击，而将其上的外源基因带 大豆子叶节的方法获得大豆转基因植株 人到植物细胞内。[6] 1999年胡张华等在研 [1-4] 究影响基因枪遗传转化因子时发现，CaC12 笔者对大豆转基因的方法进行了综述。 浓度、氦气压力和受体状态等对大豆转化频 1 大豆转基因的主要方法 率有重要影响，在基因枪轰击前24 h，用5Gy 大豆转基因的方法主要有农杆菌介导法、 辐射处理愈伤组织，转化效率获得了提高 。 基因枪法、电激法、PEG法、超声波辅助农 [7] 杆菌转化法和花粉管通道法等。 评论： 其中，以农杆菌介导法和基因枪法为大 基因枪法具有操作方法简单，转化时间短、 豆常用的转基因方法。[1] 数量大，基因用量少，可转化基因片段大， 1．1 农杆菌介导法 实验费用低等优点，但，由于基因枪法转导 农杆菌是一种革兰氏阴性土壤杆菌。与植物 的外源DNA是随机整合到宿主基因组中的， 基因转化有关的有两种类型：一为根癌农杆 这不利于外源DNA在宿主植物中稳定地表达 菌，含有Ti质粒，能诱导被侵染的植物细胞 和遗传。因为随机整合位 形成冠瘿瘤；二为发根农杆菌，它含有Ri质 点不固定和外源DNA拷贝数多等问题会导致 粒，能够诱导被侵染的植物细胞产生毛发状 转基因后代的突变率提高的现象。存在转化 根。Ti质粒(包括Ri质粒)上有一段转移DNA， 过程对细胞有损害、转化率低、可重复性差 在农杆菌侵染植物时，这段DNA可以插入到 及设备昂贵等缺点。如果一次性对大豆进行 植物基因组中，使其携带的基因在植物中得 大片段的基因转化的话适宜使用此种方法。 以表达。[5] 2 总结 评论： 虽然利用农杆菌介导的方法已将许多具有 该转化体系利用天然的转化载体系统，成功 实际应用价值的外源基因导入植物中，利用 率高，效果好；遗传稳定性好，大豆能较好 农杆菌介导的某些种属植物的遗传转化体 地为育种提供中间选育材料；该转化系统操 系已渐趋成熟，但要获得稳定高效的遗传转 作比较容易，需要的仪器设备简单，易于推 化程序还有许多方面的工作要做。大豆转基