获得性再生障碍性贫血患者Shelterin、TERT基因表达和其与中医证型关系的研究.pdfVIP

提 要 目的：对获得性再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞的端粒保护蛋白复合体 shelterin 及端粒酶逆转录酶 TERT 的表达水平进行研究，探讨它们之间及与获得性再 障的关系，并研究它们与再障辨证分型之间的关系，以期为再障的发生发展、治疗及 预后提供更准确的依据。 方法：收集 60 例符合纳入标准的获得性再障患者（其中慢性再障 52 例，急性再 障 8 例；中医辨证分型的急劳髓枯型 8 例，肾阳虚型 18 例，肾阴虚型 19 例，肾阴阳 两虚型 15 例）的外周血单个核细胞，提取 RNA ，并记录其血常规情况。另收集 20 例健康人外周血单个核细胞标本做正常对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应 （real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR ）检测端粒保护蛋白复合体 shelterin 的六个蛋白TRF1、TRF2 、RAP1 、TIN2、TPP1 和 POT1 及端粒酶逆转录酶 （TERT ）在获得性再障和正常对照组外周血单个核细胞中的mRNA 表达情况，分析 其与外周血白细胞以及相互之间的表达相关性。 结果：1、获得性再障患者 TRF1、RAP1 mRNA 表达水平较正常对照组明显升高， 均有显著性差异（TRF1 ，P ＜0.01 ；RAP1 ，P ＜0.05 ）；TRF2 、POT1 、TIN2 mRNA 表达水平较正常对照组明显降低（POT1 、TRF2 ，P ＜0.01 ；TIN2 ，P ＜0.05 ）。2 、急 性再障、慢性再障患者 TRF1、RAP1 mRNA 表达情况均较正常对照组明显升高（P ＜0.05 ）；急性再障、慢性再障患者TIN2、POT1 mRNA 表达情况均较正常对照组明 显降低（P ＜0.05 ）；急性再障患者 TRF2 mRNA 表达情况较正常对照组显著降低（P ＜0.05 ）；急性再障患者TIN2 mRNA 表达情况较慢性再障患者明显降低（P=0.039 ，P ＜0.05 ）。3、中医辨证分型的肾阴虚型、急痨髓枯型患者 TRF1 、RAP1 mRNA 的表 达水平较正常对照组明显升高（P ＜0.05 ）；肾阴虚型 TRF2、TIN2 、POT1 mRNA 的 表达水平较正常对照组明显降低（TRF2、POT1 ，P ＜0.05 ；TIN2，P ＜0.01 ）；肾阴阳 两虚型和急痨髓枯型获得性再障患者 TIN2、POT1 mRNA 的表达水平均较正常对照 组明显降低（P ＜0.05 ）。4 、中医各证型间，肾阴虚型、肾阴阳两虚型、急痨髓枯型 患者 TIN2 mRNA 表达水平均较肾阳虚型明显降低（肾阴虚型 P=0.027 ，P ＜0.05 ；肾 阴阳两虚型P=0.016 ，P ＜0.05 ；急痨髓枯型P=0.002 ，P ＜0.01 ）；肾阴虚型患者TPP1 mRNA 表达水平较肾阳虚型患者明显降低（P=0.041 ，P ＜0.05 ）；肾阳虚型患者TERT mRNA 表达水平较肾阴虚型、肾阴阳两虚型、急痨髓枯型患者明显升高（P ＜0.05 ）。 5、TIN2 mRNA 表达水平与白细胞及淋巴细胞有明显相关性；POT1 mRNA 表达水平 与年龄有明显相关性；TERT mRNA 表达水平与红细胞及血红蛋白有明显相关性。6、 TERT 与 TRF1、TPP1 、POT1 mRNA 表达水平之间存在相关性；TRF2 与 TPP1 、POT1 、 RAP1 、TIN2 mRNA 表达水平之间存在相关性；TPP1 与 TERT、TRF2、POT1 、RAP1 mRNA 表达水平之间存在相关性；TIN2 与 TRF1、TRF2、POT1 mRNA 表达水平之 间存在相关性。 结论：1、端粒保护蛋白 shelterin 组分的 TRF1、TRF2 、TIN2、POT1 、RAP1 以 及端粒酶逆转录酶（TERT ）水平的改变可能在获得性再障的发病中起一定作用；并 且 TIN2、POT1 、TERT 可能与获得性再障的发病关系更密切。2 、TRF1、RAP1 在 肾阴虚型最高，在肾阳虚型最低；TRF2、TIN2、POT1 、TPP1 在在肾阴虚型中最低， 肾阳虚型中最高。提示