物分离工程第六章 离子交换与吸附.pptVIP

* * 洗脱方式 离子交换完成后，将树脂吸附的物质重新转入溶液的方法 洗脱方法 （1）改变溶液pH值 （2）改变溶液离子强度 * 树脂再生 是指使离子交换树脂重新具有交换能力的过程 酸性阳离子树脂 酸-碱-酸-缓冲溶液淋洗 碱性阴离子树脂 碱-酸-碱-缓冲溶液淋洗 方式有：顺流再生和逆流再生 * 硬水软化 * 离子交换应用实例 离子交换法提取蛋白质 较无机离子的离子交换平衡复杂，其吸附行为与离子间的静电引力、氢键、疏水作用以及范德华力有关 蛋白质是生物大分子物质，因此，其扩散行为也较无机离子复杂 * Some of the charged regions which will influence ion exchange Different proteins have different charges and different patterns of surface charge Basis for selectivity * NH3 R COOH + NH3 R COO + - R NH2 COO - Low pH Positive charge High pH Negative charge Hydrogen gained Hydrogen lost Effect of pH on charge * - + Overall charge on protein NH3 R COOH + NH3 R COO + - R NH2 COO - acid isoelectric point alkaline excess positive charge balanced positive and negative charge excess negative charge pH 3 10 Titration curves * * 蛋白质离子交换分离的基本步骤 平衡 上样吸附 洗脱 再生 * + + + + + + - - - - - - - anion exchange bead Equilibration * Sample application and wash - - - - - - - - - - - + + + + + + - - - - * Elution - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + - - * Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + * Sample application and wash Elution Equilibration Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - - - - - * 常用于蛋白质提取分离的离子交换剂 要求：良好的亲水性、具有较大的均匀网格结构、粒度越小分辨率越高 种类：多糖类 离子交换纤维素 交联葡聚糖 交联琼脂糖 聚乙烯醇类 Mono系列 Amersham Pharmacia * 本章作业 P173 T1-10题 影响吸附的主要因素？（T5重复） 亲和吸附的原理和特点是什么？ 常用的离子交换树脂类型有哪些？（T7重复） 影响离子交换速度的因素有哪些？（T8重复） 用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些特殊要求，主要有哪几类？ * 离子交换(ion exchange) 概念：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 * 离子交换树脂的结构 具有三维空间立体结构的网络骨架 联接在骨架上的活性基团 活性基团所带的相反电荷的活性离子（可交换离子） * 树脂的网络骨架（类似于大孔树脂） * 离子交换树脂三维空间立体结构 * 离子交换的分类 按活性基团分类，可分为阳离子交换树脂(cation