反相高效液相色谱法分析甲苯反相高效液相色谱法分析甲苯.pdfVIP

反相高效液相色谱法分析甲苯反相高效液相色谱法分析甲苯、 萘和联苯萘和联苯 主讲教师：石金辉 一、目的要求的要求 理解反相高效液相色谱法的基本原理及影响 组分保留值的因素。 学习用反相高效液相色谱法分析混合芳烃学习用反相高效液相色谱法分析混合芳烃。 掌握HPLC分析的定性、定量方法。 掌握 C分析的定性、定量方法 理解流动相组成对样品组分保留时间的影响。 2 二、方法原方法原理 用非极性的十八烷基键合固定相，多以甲醇-水或乙睛- 水作为流动相水作为流动相 （（极性流动相极性流动相），），用以分离非极性或极用以分离非极性或极 性小的化合物，该方法是目前最常用的反相液相色谱 法。 对非离子型化合物，分子极性愈大，保留值愈小；在 同系物中链越长、苯环越多，保留值越大。 同系物中链越长 苯环越多 保留值越大 流动相也影响被测组分的保留值，流动相的极性越小， 保留值越小保留值越小。。在常用的溶剂中在常用的溶剂中，，以水的极性最大以水的极性最大，，因因 此流动相中水的含量减小，流动相的极性减小，组分 的保留值减小。 3 实验任务实验任务 分离甲苯、萘、联苯3种芳烃的混合物， 由于苯环个数或分子的表面积有显著差由于苯环个数或分子的表面积有显著差 别，因此在反相高效液相色谱中得到很 好的分离。用保留时间定性，根据峰面 积标准工作曲线定量。 积标准工作曲线定量。 4 三、仪仪器与试剂与试剂 仪器：Shimadzu LC-10ATVP高效液相 色谱仪色谱仪，检测器为检测器为SPDSPD-M10AM10Avp二极管极管 阵列检测器。 5 液相色谱流程图液相色谱流程图 进样器 流动相 输液泵 柱温箱 检测器 数据处理 6 ShimadzuShimadzu LCLC-10ATVP10ATVP高效液相色谱仪高效液相色谱仪 7 三、仪仪器与试剂与试剂 色谱条件： 色谱柱：Shimadzu VO-ODS （4.6 ×150mm）C18分析柱 流动相流动相：AA液液：水水；BB液液：甲醇甲醇。用前用超声波脱气用前用超声波脱气。 UV-检测器，检测波长254nm。 进样体积：20uL;流动相流速：1.0mL/min。 样品：甲苯、萘、联苯的混合甲醇溶液。 8 四四、仪仪器操作步骤操作步骤 开启色谱仪，先开启泵、在线脱气机、柱温箱、检 测器测器，，再开启系统控制器再开启系统控制器，，最后开启电脑最后开启电脑。。