核糖体失活蛋白及其在植物抗真菌病基因工程中的应用.pdf

5生物工程进展6 2000, Vol. 20, No. 6 核糖体失活蛋白及其在植物抗真菌病基因工程中的应用 单丽波 贾 旭 ( 中科院遗传 植物细胞与染色体工程国家重点实验室北京 100101) 真菌病是农作物减产的主要原因之一。而植物界大量存在着具有离体抑制真菌生 增殖 能力的蛋白质, 核糖体失活蛋白( RIP , ribosome inactivat ing prot ein) 就是其一。它能特异地水解核 糖体RNA 3c2端茎环结构的腺嘌呤残基而导致核糖体失活, 进而抑制蛋白合成。但它却不使自身 的核糖体失活, 只对其它物种核糖体显示高度特异性, 这显然具有防止外来病原体侵染的功能。 利用基因工程技术, 使其在一些经济作物中高效表达, 筛选具有抗性的转基因植株, 这正日益成为 植物真菌病防治的新途径。它克服了常规育种周期 , 抗性种质缺乏的弊端, 更避免了施用农药 带来的环境污染等问题, 其应用前景甚为广阔。围绕其在抗真菌病基因工程中的应用, 本文对核 糖体失活蛋白在植物体中的分布、分类、生化、结构、功能特性、作用机制以及应用前景等作简要、 全面的阐述。 RIP [ 13] [3] lus) 叶子 , 肥皂草( Saponaria officinalis)种子 1 RIP 、 蛋白中均含有Ñ 型RIP 。其中肥皂草种子蛋白中 [ 1 [3] RIP 分为两类 , 一类( Ñ型) 为一种单链蛋白, 皂毒苷含量高达10% 。随着更深入的研究, 发现 分子量约26- 32kD, 呈碱性, 等电点(pI) 均大于10, 同一植物来源的RIP 也会略有差别,它们为同一蛋 [2 [ 14 多数为糖蛋白, 且非常稳定 。如皂毒苷( saporin) , 白的异构型( isoform) , 其间仅相差几个氨基酸 。 在有某些变性剂及蛋白水解酶时, 仍可稳定存 Ò型RIP 分布范围相对较窄( 表2) , 目前仅知 [3 [15~ 17] 在 。另一类( Ò 型) 除具有一条与Ñ 型RIP 单链 蓖麻 ( Ricinus communis) 种子 , 相 思子 [18] 功能相似的A 链外( 毒素链) , 还具有一条可结合D (Abrus precatorius) 种子 , 槲寄生( Viscum al2 型半乳糖的B 链( 结合链) , 其间仅靠一个二硫键及 bum) 叶子[19, 20,24] , ( Adenia digitata ) 根[22) 24] , 氢键相连。A 链分子量与Ñ 型单链相似, 约30kD, (Adenia velkenssi) 根[25, 26 中含有。