同型半胱氨酸对培养内皮细胞损伤的研究.pdfVIP

( ) ·268 · 中国病理生理杂志 　Chinese Journal of Pathophysiology 　2001 ,17 3 :268 - 270 ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2001 03 - 0268 - 03 同型半胱氨酸对培养内皮细胞损伤的研究 1 1 2 1 1 王玉芳 , 　王树人 , 　陈海艳 , 　杨志梅 , 　顾 　玲 (华西医科大学 1病理生理教研室 , 2 附属第二医院儿科 ,四川 成都 610041) 　　[摘 　要] 　 目的:本研究拟探讨同型半胱氨酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应 , 以揭示同型半胱氨酸致动 脉粥样硬化的可能机制 。方法 : 将人脐静脉内皮细胞暴露于不同浓度的同型半胱氨酸24 h 后 ,观察细胞形态并测定 细胞的乳酸脱氢酶释放率 、总蛋白含量 、凋亡及脂质过氧化的程度 。结果 : ( 1) 同型半胱氨酸不仅可诱导细胞凋亡而 ( ) ( ) 且在较高浓度时可致细胞坏死 ; 2 同型半胱氨酸有较强的促脂质过氧化的效应 ,并呈量效关系 ; 3 同型半胱氨酸的 上述效应因加入LDL 而增强 ,示同型半胱氨酸与LDL 有协同作用 。结论 : 同型半胱氨酸可能是通过氧化应激机制导 致内皮细胞出现坏死 ,凋亡等损伤的改变 。 [主题词] 　高半胱氨酸 ; 内皮 ,血管 ;细胞 　　[ 中图分类号] 　R543 　　　　　[文献标识码] 　A ( ) 　　同型半胱氨酸 homocysteine , Hcy 是近几年发现 白的含量 ,与对照组相比,蛋白含量下降说明细胞正 的独立于其它已知危险因素的一个新的致动脉粥样 常的合成代谢受到抑制 。 硬化因素[ 1] 。本文从培养的人脐静脉内皮细胞暴露 24 　细胞凋亡的测定 　采用碘化丙啶(propidium io 于不同浓度的 Hcy 的改变入手 ,探讨 Hcy 对 内皮细 ) [4 ] dide , PI 插入 DNA 定量染色法 。将细胞悬液标本 胞的损伤效应 , 以了解其在动脉粥样硬化发病过程 按 1/ 50 稀释后悬浮于 2 mL 含 1 % Triton - X - 100 和 中的作用 。 PI 荧光剂的液体中 ,染色 60 min 后流式细胞仪测定 , 应用 Multicycle 分析软件包分析细胞凋亡率 ,用以表 材 　料 　和 　方 　法 示细胞凋亡的情况 。 1 　内皮细胞培养及鉴定 25 　人天然低密度脂蛋 白( low density lipoprotein , 取健康产妇剖腹产分娩 的新生儿脐带 , 根据