胆结石中蛋白质的傅里叶变换红外光谱和表面增强拉曼光谱研究3.pdf

第 22 卷 　第 4 期 光 　学 　学 　报 Vol. 22 ,No. 4 2002 年 4 月 　　　 　　 　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　April , 2002 ACTA OPTICA SIN ICA 文章编号 : (2002) 胆结石中蛋白质的傅里叶变换红外光谱和 表面增强拉曼光谱研究 刘 　刚 　邢 　达 (华南师范大学激光生命科学研究所 , 广州 510631) 王海珉 　吴 　杰 ( 昆明医学院基础医学部, 昆明 650031) 摘要 : 　用氯仿、乙醚、乙醇和盐酸等溶剂溶解一组人体胆结石 ,获取难溶物 ;用傅里叶变换红外光谱和表面增强拉 曼光谱对难溶剩余物进行研究。结果显示 ,结石难溶物主要由胆红素盐和蛋白质组成 ,结石中的蛋白质的二级结 α α 构以 螺旋和无规卷曲构象为主 , 其中 , 螺旋构象成分较多。讨论了蛋白质在胆结石形成中的作用。 关键词 : 　胆结石 ; 红外光谱 ; 表面增强拉曼光谱 ; 蛋白质 中图分类号: Q632 　　　文献标识码 : A 1 　引　　言 谱技术亦用于研究胆结石[ 10 ,13～16 ] ,但是 , 由于荧光 胆结石是一种世界性疾病 ,且发病率还呈增加 信号的干扰 ,一般难于获得好的拉曼光谱。表面增 趋势[ 1 ] , 目前尚无有效的预防和治疗药物。胆结石 强拉曼散射技术被证明是获取含荧光色团物质的拉 的发病机理研究已成为当代医学的重要问题之一。 曼光谱的强有力手段 , 已对胆红素与金属络合物进 胆结石是胆汁中多种成分在多因素影响下相互作用 行了研究[ 17 ] ,我们用此技术对胆结石的表面增强拉 的结果[ 2 ,3 ] ,迄今 ,胆结石的成分和结构还没有彻底 曼光谱也进行了初步研究[ 18 ] 。 弄清楚。蛋白质在结石的形成过程中可能起重要的 本文用氯仿、乙醚、乙醇和盐酸等溶剂溶解一组 作用 ,一些蛋白质如粘糖蛋白[ 4 ] 、钙结合蛋白[ 5 ] 、免 人体胆结石 ,获得了胆结石难溶物的表面增强拉曼光 [ 6 ] 谱 ,直接得到了色素型胆结石难溶物中蛋白质的酰胺 疫球蛋白 对胆结石的形成可能起促成核和网架的 作用。在胆结石中鉴定出 17 种氨基酸[ 7 ] ,聚丙烯酰 振动带 ,并对难溶物中蛋白质的二级结构以及蛋白质 胺凝胶电泳证明色素型胆结石难溶物中含蛋白质和 在结石的形成过程中所起的作用进行了讨论。 糖多肽[ 8 ] 。但是 ,胆结石中蛋白质的二级结构目前 还不清楚 ,且胆结石中蛋白质与其它物质是怎样结 2 　实　　验 合的 ,也不清楚。这方面的信息有助于深入了解胆 2. 1 　胆结石样品处理 结石的成石机制。 胆结石样由昆明医学院附属第一医院提供 ,均 红外光谱技术已被用于分析胆结石的有机和无 [ 9～12 ] 为手术从胆囊取出。取出后用水冲洗、凉干待用。 ( 机成分 , 除了蛋白质含量较多的黑色结石 又 [ 12 ] 每例选一粒从