生理学试验指导.DOC

生理学常用实验 实验一 制备坐骨神经-腓肠肌标本 【实验目的】 学习制备坐骨神经-腓肠肌标本的方法。 【实验原理】 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相近似，而其离体组织所需要的存活条件比较简单，容易满足。因此在实验中常用蟾蜍或蛙坐骨神经-腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程和刺激-反应的一些规律以及骨胳肌的收缩特点等。坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法是生理实验中的一项基本操作技术。 【实验对象 】 蟾蜍。 【实验器材和药品】 蛙类手术器械，粗剪刀，蛙板，滴管，培养皿，任氏液，烧杯。 【标本制作方法】 1．破坏脑和脊髓：取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。用左手持蟾蜍。持法是掌心向上，蟾蜍脊背向上。以食指和中指根部夹持前肢，以无名指和小指根部夹住后肢，以拇指尖抵在枕骨大孔后缘，右手持探针从枕骨大孔垂直刺入，然后向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后左拇指轻轻抵压在蟾蜍背上，使脊柱伸直，将探针退到枕骨大孔处（但不要退出体外），再转向后方，刺入椎管捣毁脊髓。此时如蟾蜍的四肢松软即表示脑脊髓已完全破坏，否则应按上法再行捣毁（图8-1-1）。 2．剪去躯干上部及内脏：左手握蟾蜍后肢，用拇指和食指持住骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂．右手持粗剪刀，在骶骼关节水平以上0.5~1厘米处剪断脊柱，沿两侧剪除一切内脏及头胸部（注意勿损伤坐骨神经），仅留下后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经（图8-1-2）。 3．剥皮：用左手持住脊柱断端（注意不要压伤神经），右手捏住皮肤断端，向下牵拉，剥掉全部后肢皮肤，将标本背面向上放在予先滴有任氏液的瓷砖上（图8-1-3） 6．制作坐骨神经-腓肠肌标本：取一腿放于蛙板上。 （1）游离坐骨神经：先将标本腹面向上，用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经。将发出坐骨神经处的脊骨连同神经与周围的骨骼、肌肉离断，然后将标本背侧向上放置，把梨状肌及其附近的结缔组织剪断，再循坐骨神经沟（股二头肌及半膜肌之间的裂缝处）找出坐骨神经之大腿部分，用玻璃分针顺着神经走行方向小心剥离，然后左手持镊提起连接着坐骨神经的脊骨，右手持眼科剪从脊住根部开始向下分离坐骨神经，剪断所有神经分支，将神经一直游离至腘窝为止（图8-1-4）.用锌铜弓检查标本：用锌铜弓两极接触坐骨神经，如腓肠肌发生明显而灵敏的收缩，则表示标本的兴奋性良好，即可将标本放在任氏液中，以备做实验之用。 【注意事项】 1．在制备标本时，避免用金属器械夹持神经干和腓肠肌。 2．分离神经时，注意认清神经在肌肉之间的走向，不要乱剪。周围的结缔组织要剥干净。 3．制备标本的过程中，要随时用任氏液湿润神经和肌肉，防止干燥。 4．制备标本的过程中，不能使动物皮肤的分泌物和血液等沾污神经和肌肉，更不能用自来水冲洗，以免影响组织的机能。 （刘月英 李大力） 实验二 刺激强度和刺激频率与骨骼肌收缩的关系 【实验目的】 1.观察刺激强度与骨骼肌收缩之间的关系 2.观察刺激频率与骨骼肌收缩反应形式之间的关系 【实验原理】 刺激引起组织兴奋必需具备三个条件，即刺激的强度、刺激的持续时间和强度-时间变化率。本实验是观察刺激强度和刺激频率与骨骼肌兴奋收缩的关系。兴奋性是指细胞在受刺激时产生动作电位的能力。肌肉组织具有兴奋性，受到刺激后会产生动作电位，发生反应，表现为肌肉收缩。引起组织发生反应的刺激应是适宜的有效刺激。刚能引起收缩反应的最小刺激强度称为阈强度，该刺激为阈刺激。就单条骨骼肌纤维而言，它对刺激的反应具有“全或无”的性质，而蟾蜍或蛙的腓肠肌内含有许多条骨骼肌纤维，它们的兴奋性不同，因而所需的阈刺激强度也不同。 如果刺激强度低于任何肌纤维的阈强度则没有动作电位产生，无收缩反应；当刺激强度增加到能引起少数肌纤维兴奋时，可产生较小的复合动作电位，记录到较低的肌肉收缩波形；继续增加刺激强度，兴奋的纤维数量增多；当刺激强度增加到使全部肌纤维兴奋时，复合动作电位幅度达到最大，肌肉收缩幅度亦达最大；再增加刺激强度时，复合动作电位的幅度和肌肉收缩幅度都不会再增加。由此可见，整块肌肉对刺激的反应不表现“全或无”，而是呈现出在一定范围内其收缩力与刺激强度成正比的关系，即随着阈上强度的不断增加，骨骼肌的收缩反应相应加大，直至出现最大反应。此时的最小刺激强度称为最适强度，该刺激为最适刺激。 在一定的刺激强度下，不同的刺激频率可使肌肉出现不同的收缩形式。如果刺激的间隔时间大于肌肉收缩的收缩期与舒张期之和时，刺激引起肌肉出现一连串的单收缩；随刺激频率增加，刺激间隔时间缩短，如果刺激的间隔时间大于收缩期，但小于收缩期与舒张期之和时，则后一刺激引起的肌肉收缩落在前一刺激引起收缩过程的舒张期内，即出锯齿状的不完全性强